[發明專利]一種從茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法

有效

• 申請號: 201110146626.X
• 申請日: 2011-06-01
• 公開（公告）號: CN102210785A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 王普;姜運耀;何軍邀
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: A61K36/82
• 分類號: A61K36/82;A61P3/10
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

(一)技術領域

本發明涉及一種從茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法。

(二)背景技術

α-淀粉酶抑制劑是一種新型治療糖尿病和肥胖癥的藥物，通過抑制人體糖代謝的關鍵酶α-淀粉酶的生物活性，減少食物中碳水化合物的消化吸收，從而達到降血糖和減輕體重的作用。與其他降糖減肥產品相比，副作用較小，因此開發α-淀粉酶抑制劑對特定人群的降糖及減肥具有較好的應用前景。

茯磚茶是以黑毛茶作為原料，經過篩分、汽蒸、漚堆、壓制、發花和干燥等工序加工而成的一種黑茶，分為特制茯磚茶和普通茯磚茶，它們之間的主要區別，在于原料的拼配不同：特制茯磚全部用三級黑毛茶作原料，而壓制普通茯磚的原料中，三級黑毛茶只占40～45％，四級黑毛茶占5～10％，其他茶占50％。茯磚茶主要銷往甘肅、新疆、西藏等邊疆地區，是我國邊疆游牧民族生活的必需品。近年來，國內外研究者從不同角度研究了茯磚茶的生物活性，對茯磚茶的減肥、降血脂、抗腫瘤、治療腹瀉等效應進行了探討，取得了良好的效果，但尚未見有對茯磚茶中α-淀粉酶抑制劑活性物質提取方面的研究報道。

(三)發明內容

本發明目的是提供一種從特制茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法，制備工藝簡單，成本低，所提取的α-淀粉酶抑制劑有較高的生物活性。

本發明采用的技術方案是：

一種從茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法，所述方法包括：

(1)將茯磚茶粉碎，所得茶粉加入8～15倍量的40％～60％乙醇水溶液(m：v，茶粉質量以g計，乙醇水溶液體積以mL計)，40℃～60℃恒溫提取1～3次、每次1h～3h，合并提取液濃縮至無乙醇味得到濃縮液；所述茯磚茶為市購特制茯磚茶；

(2)將步驟(1)所得的濃縮液用三氯甲烷萃取3～5次，分離取水相溶液用乙酸乙酯萃取3～5次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α-淀粉酶抑制劑。

優選的，所述茯磚茶粉碎過20～40目篩得到茶粉。

優選的，所述方法如下：

(1)將茯磚茶粉碎過20～40目篩，所得茶粉加入10倍量的55％乙醇水溶液，54℃恒溫提取2次、每次105min，合并提取液濃縮至無乙醇味得到濃縮液；

(2)將步驟(1)所得的濃縮液用等體積三氯甲烷萃取4次，分離取水相溶液用等體積乙酸乙酯萃取4次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α-淀粉酶抑制劑。

本發明從茯磚茶中分離提取出α-淀粉酶抑制劑活性物質主要成分為茯磚茶多酚，多酚含量為60％～75％，該α-淀粉酶抑制劑活性較高，優選條件下對α-淀粉酶的半抑制濃度(IC₅₀)為1.09mg/mL。

本發明有益效果主要體現在：以茯磚茶為原料制備α-淀粉酶抑制劑，制備工藝簡單，所得產品對α-淀粉酶有較好的抑制活性，有利于提高茯磚茶的附加值，為茯磚茶進一步開發成保健和功能性食品提供方法。

(四)具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護范圍并不僅限于此：

實施例1：α-淀粉酶抑制劑活性的測定

利用3，5-二硝基水楊酸法(DNS法)進行測定，具體如下：將0.2mLα-淀粉酶溶液(用含6.7mmol/L?NaCl的pH?6.9、20mmol/L磷酸緩沖液配制)與0.2mL含不同濃度α-淀粉酶抑制劑的提取液混合均勻，并置于37℃水浴中預熱15min后，加入0.6mL預熱到37℃的10g/L的淀粉溶液。反應5min，立即加入1.0mL?DNS顯色劑。于沸水中顯色5min，冰水浴冷卻后用8mL去離子水稀釋，取樣0.2mL于96孔板，用酶標儀于540nm處測定吸光值。以不加α-淀粉酶抑制劑的試樣為對照。α-淀粉酶抑制劑對α-淀粉酶抑制率的計算方法為：

抑制率(％)＝(1-加入抑制劑后α-淀粉酶活性/不加抑制劑α-淀粉酶活性)×100％。

實施例2：以α-淀粉酶抑制劑對α-淀粉酶活性的抑制率為參考的醇提工藝的確定：