[發明專利]米氏凱倫藻提取物、制備方法及用途

無效

• 申請號: 201110141551.6
• 申請日: 2011-05-30
• 公開（公告）號: CN102210721A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 譚成玉;趙瑩;吳迪;李倩;葉敏慧;李偉
• 申請（專利權）人: 大連海洋大學
• 主分類號: A61K36/02
• 分類號: A61K36/02;C08B37/00;A61P35/00
• 代理公司: 大連非凡專利事務所 21220
• 代理人: 閃紅霞

技術領域

本發明涉及一種海洋微藻—米氏凱倫藻提取物、制備方法及在制備抑制腫瘤血管生成活性藥物中的應用。

背景技術

隨著人類社會發展，環境污染加劇，腫瘤尤其是惡性腫瘤—癌癥，已經成為人類死亡的第一位或第二位原因，從1996年以來全球每年新確診的腫瘤病人均在1000萬以上，約有700萬人死于癌癥。目前癌癥病人呈總體增加及“年輕化”趨勢，同時隨著全球老齡化社會的到來以及腫瘤發病率的上升，臨床上對療效好、毒副反應小的抗腫瘤藥物的需求量激增。腫瘤不管是良性還是惡性，本質上都表現為細胞的異常增殖，在惡性腫瘤中表現為對鄰近正常組織的侵犯及經血管、淋巴管和體腔轉移到身體其它部位，即腫瘤轉移。腫瘤轉移是惡性腫瘤的基本生物學特征，是臨床上絕大多數患者的致死因素。因此腫瘤轉移對于癌癥治療是一種嚴峻挑戰。

文獻1闡述了Folkman提出的“腫瘤的生長和轉移都依賴于新生血管”的概念（文獻1.?Folkman?J.?Angiogenesis?in?psoriasis:?therapeutic?implications.?J?Invest?Dermatol?1972,?59?(1):40.），并指出可以通過抑制腫瘤血管生成抑制腫瘤的生長和轉移。腫瘤的血管生成能力被認為是腫瘤侵襲性的標志，豐富的血管網不僅為腫瘤細胞提供充足的氧氣、營養成分和腫瘤生長因子等，而且也是腫瘤轉移的通道。

文獻2闡述了腫瘤血管生成的分子機制（文獻1．Patrick?A,?Sylvie?L,?Fr′ederic?LL,?Andreas?B.?Molecular?mechanisms?of?tumor?vascularization.?Critical?Reviews?in?Oncology/Hematology?2005;?54:?53–61.）。血管生成需要血管內皮細胞的遷移、增殖和形成管狀結構。腫瘤細胞能夠產生大量的生長因子，包括VEGF、FGF、TGF等。這些生長因子能夠通過一系列的信號傳導促進血管內皮細胞的遷移、增殖和形成管狀結構，最終形成新的血管。可見，血管內皮細胞的遷移、增殖和形成管狀結構是形成新生血管的必要條件。

米氏凱倫藻屬于裸甲藻目，凱倫藻屬，為世界廣布種，常見于溫帶和熱帶淺海水域，是一種典型的魚毒性赤潮藻。2000年，Hasen將米氏凱倫藻從裸甲藻獨立出來，建立Karenia屬，定名為Karenia?mikimotoi，中文譯名為米氏凱倫藻。目前關于它的報道主要集中于產生毒素及所造成的赤潮危害，迄今為止還未見關于從米氏凱倫藻中提取腫瘤血管生成抑制劑的相關報道。

發明內容

本發明是為了解決現有技術所存在的上述技術問題，提供一種氏凱倫藻提取物、制備方法及在制備抑制腫瘤血管生成活性藥物中的應用。

本發明的技術解決方案是：

一種米氏凱倫藻提取物，其特征在于是用溶劑提取法對米氏凱倫藻進行提取，減壓濃縮、冷凍干燥后所得的產物。

一種上述米氏凱倫藻提取物的制備方法，其特征在于：稱取米氏凱倫藻藻粉，放入提取器中，加入體積與藻粉質量比為8~30ml/g的70%乙醇浸泡，加熱回流提取，提取溫度為達至沸騰溫度，提取次數為1~3次，每次提取時間為1.0~3.0h；收集合并冷卻后的提取液，減壓濃縮，冷凍干燥得米氏凱倫藻醇提取物。

一種上述米氏凱倫藻提取物的制備方法，其特征在于稱取米氏凱倫藻藻粉，放入提取器中，加入體積與藻粉質量比為8~30mL/g的純水浸泡，加熱回流提取，提取溫度為達至沸騰溫度，提取次數為1~3次，每次提取時間為1.0~3.0h；收集合并冷卻后的提取液，減壓濃縮，冷凍干燥得米氏凱倫藻水提取物。

取制備的米氏凱倫藻水提取物，加入體積與米氏凱倫藻水提取物質量比為8~15ml/g的純水溶解，再向其中加入質量分數為3%的三氯乙酸，再加入體積分數為60~80%濃度為95%以上的乙醇，收集沉淀得米氏凱倫藻多糖。

一種上述米氏凱倫藻提取物在制備抑制腫瘤血管生成活性藥物中的應用。

本發明是以來源廣泛、價格低廉的海洋赤潮微藻—米氏凱倫藻為原料，利用溶劑提取法對其進行提取，并可經三氯乙酸除蛋白，80%乙醇沉淀獲得多糖。所得到的米氏凱倫藻提取物及其純化的多糖經過腫瘤細胞培養液誘導的CV304細胞實驗證明，具有顯著的抑制其增殖和遷移活性，且無毒副作用、安全性高、成本廉價，可廣泛應用于制備抑制腫瘤血管生成的藥品、保健食品及食品添加劑中。本發明操作簡單，所用溶劑均為普通化學試劑，易重復，適于大規模生產。

附圖說明