[發明專利]一種酸性橙Ⅱ快速檢測卡及其檢測方法

無效

• 申請號: 201110141144.5
• 申請日: 2011-05-30
• 公開（公告）號: CN102162814A
• 公開（公告）日: 2011-08-24
• 發明（設計）人: 周堅;吳文曄;熊曉芳
• 申請（專利權）人: 無錫安迪生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本發明涉及一種酸性橙Ⅱ快速檢測卡及其檢測方法，是一種檢測酸性橙Ⅱ的檢測器具，屬于食品中違法添加非食用物質檢測技術領域。

背景技術

酸性橙Ⅱ是一種偶氮類酸性工業染料，又名酸性金黃Ⅱ、金橙Ⅱ或酸性艷橙GR，俗名金黃粉。溶于水，乙醇。主要用于蠶絲、羊毛的染色，也可染皮革、紙張、錦綸，能印花，還可用作指示劑。撥染性、勻染性好，染色牢度較差，適用于色澤鮮艷度高的絨線染色。染色時遇銅離子趨向紅暗，遇鐵離子色澤淺暗。

偶氮類染料本身無任何直接的致癌作用，但是在體內還原分解，可形成芳香胺化合物，芳香胺在體內經過代謝活動后與靶細胞作用可能使DNA發生變化，成為人體病變的誘發因素，對人體和動物有潛在的致癌性和致突變性。由于其致癌性和致突變性，世界上很多國家對酸性橙Ⅱ的使用實施了嚴格的規定。在我國，酸性橙Ⅱ禁止被用作食品添加劑。

酸性橙Ⅱ屬非食用色素，食品中不允許加入。但是由于酸性橙Ⅱ色澤鮮艷，著色穩定、價廉等特點，一些不法商販為了牟取暴利將其用于食品生產和加工，我國市售和出口海外的蜜餞、豆制品、鹵制品、辣椒面、紅殼瓜子等均被檢出過含有酸性橙Ⅱ等類似合成非食用色素，嚴重危害了消費者身體健康，并且常常導致出口食品被迫就地銷毀。所以酸性橙Ⅱ檢測方法的開發刻不容緩。

目前，檢測食品中違法添加的酸性橙Ⅱ的主要方法有高效液相色譜法及液質聯用等進行定性和定量的分析。這些方法對實驗儀器設備要求高，操作繁瑣，對操作人員的專業知識要求高，費時費力。因此建立一種準確可靠又快速方便的檢測食品中違法添加的酸性橙Ⅱ的分析方法是非常必要的。

本發明擬發明一種基于小分子物質酸性橙Ⅱ偶聯蛋白質后而具有抗原性的免疫學檢測方法，采取免疫學競爭法的原理，結合膠體金或乳膠顆粒標記技術和免疫層析法設計的一種快速檢測試劑，可快速特異地檢測鹵制熟食、辣椒面、飲料等樣品中的酸性橙Ⅱ。根據檢測卡樣品檢測線和質控線的有無顯色來判定鹵制熟食、辣椒面、飲料等樣品中的酸性橙Ⅱ含量。反應是利用酸性橙Ⅱ蛋白質偶聯物抗原性而建立的一種檢測方法，具有特異性強的優點，可避免其它檢測方法的假陽性導致的誤檢問題。同時檢測卡操作簡單快速，無需特殊的儀器設備，既可以在實驗室進行，也可在超市、家庭、車間等實地進行測定。由于樣本量需要少、簡便快速，適用于大量樣本的篩查。結果準確，靈敏度高，準確率大。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能檢測酸性橙Ⅱ的檢測器具，直接應用免疫學的方法檢測鹵制熟食、辣椒面、飲料等樣品中酸性橙Ⅱ的含量，克服現有色譜法檢測的操作繁瑣等缺點，建立基于免疫學特異性的檢測方法。

本發明的技術方案：一種酸性橙Ⅱ快速檢測卡，其為在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼1中設置測試條2，檢測卡外殼表面有檢測窗孔3和加樣孔4；測試條2是由支承背板5上通過不干膠在其上依次粘貼樣品墊8、膠體金膜或乳膠顆粒膜7、硝酸纖維素膜6、和吸水膜9所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端疊置粘貼吸水膜9，另一端疊置粘貼樣品墊8，吸水膜內端與樣品墊內端各自分別與硝酸纖維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜或乳膠顆粒膜7；膠體金膜為含抗酸性橙Ⅱ抗體膠體金標記的玻璃纖維膜，或乳膠顆粒膜為含抗酸性橙Ⅱ抗體乳膠顆粒標記的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有一條檢測帶和一條質控帶，依次是：含酸性橙Ⅱ蛋白質偶聯物的檢測帶10，含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶11，測試條置入檢測卡外殼內，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。

采用上述酸性橙Ⅱ快速檢測卡，檢測樣品為鹵制熟食、辣椒面或飲料等，處理方法如下：

飲料樣品：將購買的飲料如橙汁樣品用pH為8.0，含0.05%吐溫-20，濃度為0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液（PBST）按1:1稀釋，得到待測樣品。

鹵制熟食、辣椒面樣品：稱取5g樣品，研磨粉碎，加入上述pH8.0、PBST溶液10mL，振搖30min，膜過濾后用于測定。

當檢測帶10和質控帶11同時顯現棕紅色印跡帶，檢測結果為陰性，表示被檢測樣品中酸性橙Ⅱ含量未超標。

當檢測帶10不顯示顏色，只有質控帶11顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表示被檢測樣品中酸性橙Ⅱ含量超標。

當檢測帶10和質控帶11均不顯色，則表明測試條已失效。

本發明的有益效果：本發明的優點是能檢測鹵制熟食、辣椒面、飲料等樣品中含有的酸性橙Ⅱ，易于制備且節省檢測費用，使用方便，檢測快速，靈敏度高，結果準確。

附圖說明