[發(fā)明專利]一種缺血修飾白蛋白測定顯色劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110141069.2
• 申請日: 2011-05-30
• 公開（公告）號: CN102323255A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發(fā)明（設計）人: 吉權;李民友;潘能科
• 申請（專利權）人: 吉權;李民友
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 重慶市前沿專利事務所 50211
• 代理人: 郭云

技術領域

本發(fā)明屬于醫(yī)療檢測領域，具體的說，涉及一種體外診斷試劑。?

背景技術

　缺血修飾白蛋白(?ischemia?modified?albumin,IMA)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新的生化標志物,在早期診斷急性心肌梗死(AMI)中具有獨特的優(yōu)勢。在心肌缺血5～10?min內IMA即可升高,可持續(xù)6?h,其診斷心肌缺血的敏感性優(yōu)于目前所有的標志物和其他檢查。IMA?的測定通常是采用白蛋白2鈷結合(?albumin?cobalt?binding,?ACB)試驗,正常情況下血清白蛋白（HA）的N-末端可以與過渡金屬元素（如Co，Cu和Ni等）有很強的結合能力。加入氯化鈷溶液，鈷離子與白蛋白的N-末端結合，溶液中存在游離鈷的濃度較低。心肌缺血時，IMA不與Co2+結合的白蛋白,加入同樣濃度氯化鈷溶液后，溶液中存在較高濃度的游離鈷，再加入顯色劑與溶液中游離鈷發(fā)生顏色反應，采用分光光度法測定吸光度，即可推測缺血修飾白蛋白含量。常用于鈷離子顯色的化合物有二硫蘇糖醇（dithiothreitol，DTT），1-亞硝基-2-萘酚等，目前主要以用DTT配制的顯色劑為主，該顯色劑易被空氣氧化,穩(wěn)定性差,難以保存。?

發(fā)明內容

為解決以上技術問題，本發(fā)明目的之一在于提供一種成本低廉，穩(wěn)定性好，易于保存，檢測靈敏度高的缺血修飾白蛋白測定顯色劑。?

本發(fā)明目的之二在于提供一種制備缺血修飾白蛋白測定顯色劑的方法。?

本發(fā)明目的是這樣實現(xiàn)的：?

一種缺血修飾白蛋白測定顯色劑按重量份數(shù)由下列原料組成：

pH值為7.50～10.00的C溶液100份

????果糖0.5-3.0份

吐溫20?0.05-0.5份

Proclin300?0.01-0.06份；

???上述C溶液按重量份數(shù)比由1-亞硝基-2-萘酚0.8～3.6份，氫氧化鈉1.2-3.5份，溶于100份純化水中，配成溶液A；檸檬酸0.5～4.0份溶于100份純化水中，配成溶液B；用溶液B調溶液A至pH7.50-10.00得到。

通過使用1-亞硝基-2-萘酚來充當鈷離子的顯色物，加入氫氧化鈉提高1-亞硝基-2-萘酚的水溶性，用檸檬酸調節(jié)溶液pH使溶液體系更適合顯色反應，加入果糖用于保護顯色物的還原性，加入吐溫20用于保持溶液的分散性與溶解能力，加入Proclin300使緩沖液避免滋生細菌等微生物起到防腐作用。通過以上各組分的綜合作用達到提高缺血修飾白蛋白測定顯色劑的穩(wěn)定性和檢測靈敏度的目的?

一種制備缺血修飾白蛋白測定顯色劑的方法，其關鍵在于按如下步驟進行：

（1）稱取1-亞硝基-2-萘酚0.8～3.6份，氫氧化鈉1.2-3.5份，溶于100毫升純化水中，配成溶液A；稱取檸檬酸0.5～4.0份溶于100毫升純化水中，配成溶液B；用溶液B調溶液A至pH7.50-10.00，配成溶液C；

（2）量取溶液C100毫升，稱取果糖0.5-3.0份，吐溫20?0.05-0.5份，Proclin300?0.01-0.06份加入溶液C中，攪拌均勻，配成缺血修飾白蛋白測定顯色劑。

有益效果：本發(fā)明能快速檢測缺血修飾白蛋白，并且檢測比較靈敏，缺血修飾白蛋白組成成分常見，價格相對便宜，整個制備也比較方便，制備工序簡單容易操作。?

具體實施方式

實施例1?

(1)稱取1-亞硝基-2-萘酚0.8克，氫氧化鈉1.2克，溶于100毫升純化水中，配成溶液A；稱取檸檬酸0.5克溶于100毫升純化水中，配成溶液B；用溶液B調溶液A至pH7.50，配成溶液C

(2)量取溶液C100毫升，稱取果糖0.5克，吐溫20?0.05毫升，Proclin300?0.01ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成缺血修飾白蛋白測定顯色劑。

實施例2?

(1)稱取1-亞硝基-2-萘酚1.0克，氫氧化鈉1.4克，溶于100毫升純化水中，配成溶液A；稱取檸檬酸0.8克溶于100毫升純化水中，配成溶液B；用溶液B調溶液A至pH8.00，配成溶液C

(2)量取溶液C100毫升，稱取果糖0.6克，吐溫20?0.08毫升，Proclin300?0.02ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成缺血修飾白蛋白測定顯色劑。

實施例3?

(1)稱取1-亞硝基-2-萘酚1.2克，氫氧化鈉1.6克，溶于100毫升純化水中，配成溶液A；稱取檸檬酸1.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液B；用溶液B調溶液A至pH8.50，配成溶液C