[發明專利]重組人Prx-6蛋白在治療角膜損傷方面的用途

有效

• 申請號: 201110136707.1
• 申請日: 2011-05-24
• 公開（公告）號: CN102793911A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 李建遠
• 申請（專利權）人: 李建遠
• 主分類號: A61K38/44
• 分類號: A61K38/44;A61P27/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

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技術領域

本發明涉及生物技術和醫學領域，具體地說，涉及重組人Prx-6蛋白在治療角膜損傷方面的用途。

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背景技術

眼睛是對紫外輻射最為敏感的部位。研究表明，波長230nm的紫外線可全部為角膜上皮吸收，280nm的紫外線對角膜損傷力最大。紫外線被角膜上皮細胞吸收后，會產生大量的氧自由基，發生脂質過氧化作用，引起細胞死亡，細胞溶解脫落后會釋放大量炎癥刺激因子，一般在暴露后6～10小時出現迅即加重的異物刺痛感和隨之而來的畏光、流淚等癥狀，嚴重的會發生角膜上皮水腫、脫落、透明度下降等。

在紫外線輻射較強的地區，上述影響十分明顯。如：在陽光照耀的海面上或沙漠中長期了望的士兵、海員，常有暗適應能力下降的現象出現；在空氣稀薄的雪山高原上，工作人員因受雪面強烈反射的紫外反射的損傷，易患雪盲癥；人們在雪地、沙漠或海面上暴露時間過長，因受紫外輻射影響較強，易患日光性眼炎；焊工直接暴露在電弧光下每天累計15分鐘，即可發生上述病癥，稱為電光性眼炎。

目前治療主要為對癥、全身用止痛鎮靜藥物，冷敷眼瞼，包扎遮光，嚴重者可在結膜囊內滴入少量局部麻醉藥0.5％地卡因，并用抗生素眼藥水預防繼發感染。大多都沒有針對角膜上皮細胞損傷的修復、清除自由基等治療措施。

Peroxiredoxins?(Prxs)是新近發現的一類非硒依賴過氧化物酶家族蛋白，廣泛存在于各種生物體內。根據Prxs蛋白保守cys個數的不同(1個或2個)，可分為1-Cys或2-Cys亞類。迄今，已在哺乳動物組織中發現了6種Prxs蛋白。其中Prx?1-5為2-Cys酶，以硫氧還蛋白作為電子供體；Prx-6蛋白是哺乳動物中唯一的1-Cys酶，以谷胱苷肽(GSH)為電子供體(還原劑)。

Prx-6蛋白首先是在牛眼睫狀體中被分離獲得的，又名LTW4、抗氧化蛋白2、Clara細胞蛋白26、p67吞噬細胞氧化酶(phox)結合蛋白、角質化細胞生長因子(KGF)調節基因1等，由224個氨基酸組成，分子量為25.1KDa。分析該蛋白的晶體結構，發現了一個由80個氨基酸組成的硫氧還蛋白折疊，其中包含四個β折疊和兩個α螺旋。

大量研究表明，硫氧還蛋白折疊結構在一些參與氧化還原反應的蛋白(如硫氧還蛋白、谷氧還蛋白、GPx1蛋白、谷胱甘肽S-轉移酶等)中普遍存在。另外，盡管Prx-6和GPx1蛋白的一級結構只有17%的同源性，但是它們的三級結構具有極高的同源性。這種結構上的相似性，預示著這兩種蛋白在功能上的相關。

從初期細胞實驗到近年來動物體內實驗，越來越多的研究證明了Prx-6蛋白具有抗氧化損傷功能。細胞水平的研究表明，過表達Prx-6蛋白能明顯減少脂質過氧化作用，降低細胞質膜損傷；抑制Prx-6蛋白的表達，可觀察到明顯的脂質過氧化、脂膜損傷及細胞凋亡。活體水平研究表明，Prx-6轉基因小鼠對高氧損傷有顯著的保護作用；Prx-6敲除小鼠的抗氧化損傷能力明顯降低。

我們在研究人類精子成熟時，發現Prx-6蛋白由人附睪分泌到附睪管腔液中，能夠結合在精子赤道、頂體后和主段（編號為HEL-S-128m，已注冊于國際人類組織基因庫GenBank，登錄號：EU794652），具有較強的保護精子細胞抗過氧化損傷的功能，論文發表在美國雜志Mol?Cell?Proteomics.?2010.?9(11):?2517-2528。??

鑒于Prx-6自身的生物學特性，我們將其用于燒燙傷的治療，取得了良好的療效，并已申請專利（申請號：201010573594.7）。我們推測Prx-6在治療其他與氧化損傷相關的疾病中也有重要的作用。以往的研究主要是關于Prx-6蛋白在心臟、肺或皮膚組織中的抗氧化損傷作用，并未涉及到Prx-6蛋白在治療角膜損傷方面的用途。?

據對青藏高原武警官兵眼晶狀體混濁度調查顯示，駐拉薩市武警官兵（年齡25歲以上的志愿兵、機關和基層干部），眼晶狀體混濁發病率高達39.56%，并且發病率與被調查者進藏的時間增長成正比。可見紫外線對我軍官兵的眼睛健康造成了嚴重的威脅（http://www.ynnw.gov.cn/Modules/Document/infoShow1.aspx?kid=80375）。但目前還沒有理想有效的治療藥物，為此我們根據Prx-6蛋白的功能，首次進行了保護和治療紫外線損傷眼睛的治療性研究，獲得了顯著療效。

綜上所述，本中心首次將Prx-6蛋白用于治療紫外線造成的角膜損傷并取得了良好療效，填補了針對角膜損傷病因的治療藥物空白。

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