[發明專利]一種羌活種子和寬葉羌活種子的快速鑒別方法

有效

• 申請號: 201110135374.0
• 申請日: 2011-05-24
• 公開（公告）號: CN102539597A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 蔣舜媛;丁立生;徐凱節;周毅;張艷俠;孫輝;周燕;王建;張磊
• 申請（專利權）人: 四川省中醫藥科學院;四川諾托璞生態藥材有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211
• 代理人: 趙麗

技術領域

本發明涉及快速鑒定種子的方法，特別是對于羌活種子和寬葉羌活種子的快速鑒別方法。?

背景技術

羌活是我國傳統中藏羌藥中的常用藥材，始載于《神農本草經》，有數千年的藥用歷史，味辛、性溫，具解表散寒、祛風除濕、止痛之功效，主治風寒感冒，頭痛項強，風濕痹痛、肩背酸痛發等癥。《中華人民共和國藥典》2010年版I部規定其基原為傘形科(Umbelliferae)羌活屬(Notopterygium)植物羌活(Notopterygium?incisum?Ting?ex?H.T.Chang)和寬葉羌活(Notopterygium?franchetii?deBoiss.)的干燥根莖及根。主要化學成分為揮發油、香豆素和有機酚酸，除此之外還含有甾醇、糖類、氨基酸等成分。現代藥理研究表明羌活具有抗炎、解熱鎮痛、抗心律失常、抗菌和抗氧化作用，改善血液循環及增強肌體免疫功能的作用，對心腦血管疾病也有確切療效。目前入方成藥達280余種，全國關聯的制藥企業超過七百家。羌活屬為中國特有，本屬的藥用植物僅分布于我國青藏高原東緣的高寒生境，其中，羌活(Notopterygium?incisum)主產四川甘孜、阿壩州、及相毗鄰的青海南部、西藏東南部的高海拔山地，藥材習稱“川羌”，也是傳統高等級商品藥材蠶羌等的主要來源；寬葉羌活(Notopterygium?franchetii)主產青海、甘肅及四川產區的較低海拔山地，藥材習稱“西羌”，質量及商品規格均較川羌低。兩種植物來源的藥材在商品規格和市場價值上存在較大差距。?

隨著羌活藥材需求量的持續增長，加上近年來高強度的掠奪性采挖，羌活的野生資源遭受嚴重破壞，恢復和更新受到嚴重制約。為了有效保護和可持續利用該特有的民族藥用植物資源，其人工栽培日益受到關注。目前羌活種子發芽育苗技術已取得重大突破，為實現羌活人工種植的產業化提供了技術支撐，優質種子供應是羌活規模化種植必須解決的重要問題，而種子的真實性鑒別成為種子質量檢驗的基礎和核心。目前，種子真實性的鑒定方法主要有種子形態法、快速測定法(借助熒光物質等特定化學試劑顯色)、培養生長箱測定法(幼苗鑒定)；電泳法、分子標記技術鑒別。但一方面由于羌活、寬葉羌活及其偽劣種子在形態上無法區分，而采用其他生物技術手段尚未形成穩定而準確的鑒別方法；幼苗鑒定法雖能準確鑒定結果，但前后將耗時9個月以上，難以應用于生產，對羌活種子的真偽實現快速準確的鑒定成為羌活科研和生產實踐面臨的一個新的瓶頸問題。?

高效液相色譜電噴霧質譜聯用法具有快速、準確、靈敏、經濟等特點，能夠從化學成分上評價中藥材質量，做到安全、有效、可控，目前在中藥材的鑒別和質量評價領域中已經廣泛應用，有關化學計量學的主成分分析在藥材的鑒定領域已有相關報道，因此，這里首次應用高效液相色譜電噴霧質譜聯用法結合主成分分析鑒別羌活種子和寬葉羌活種子，效果顯著，為羌活屬種子的真實性檢驗提供一種強有力的分析手段。?

發明內容

本發明為解決羌活種子和寬葉羌活種子的鑒定問題，所以提出了采用高效液相色譜電噴霧質譜聯用法結合主成分分析的方法來快速鑒定羌活種子和寬葉羌活種子，不僅可以快速鑒定，而且鑒定結果準確，幾乎零誤差。?

本發明的技術方案如下：?

一種羌活種子和寬葉羌活種子的快速鑒別方法，其特征在于：以至少包括異歐前胡素、珊瑚菜內酯、異戊烯基傘形花內酯、水合氧化前胡素、香葉木素、佛手柑內酯、(-)-氧化前胡素、紫花前胡苷、佛手酚-O-β-D-葡萄糖苷、傘形花內酯、阿拉善苷C和犬尿喹酸在內的12種化合物為特征對照品，采用高效液相色譜電噴霧質譜法對不同來源的羌活種子和寬葉種子樣品進行定性定量分析，并與12種特征對照品進行比較，得出不同來源的羌活種子和寬葉羌活種子樣品的共有成分及區別性成分，并運用聚類分析法建立羌活種子和寬葉羌活種子的標準主成分分析模型，通過標準主成份分析模型得到的結果實現對待測的羌活種子和寬葉羌活種子的快速鑒別。

所述方法的具體鑒別步驟如下：?

(1)選取至少30個來源確切的羌活種子和至少30個來源確切的寬葉羌活種子標準樣品，羌活種子標準樣品為傘形科羌活屬植物羌活Notopterygium?incisum?Ting?ex?H.T.Chang，寬葉羌活種子標準樣品為寬葉羌活Notopterygium?franchetii?deBoiss.的種子；