[發明專利]基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極及其制備方法

有效

• 申請號: 201110134758.0
• 申請日: 2011-05-24
• 公開（公告）號: CN102297886A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 陳國松;耿燕;景蘇;金青;黃穎;李成東
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30;C12Q1/26
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

1.一種基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極，該葡萄糖電極包括媒介體層和酶反應層，其特征在于所述的媒介體層為硒雜二茂鐵媒介體層，其中，媒介體硒雜二茂鐵選用FcSeSeFc、FcSeCH₂SeFc和FcSe₃中的一種，硒雜二茂鐵質量百分含量為媒介體復合修飾劑的8％～9.6％。

2.根據權利要求1所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極，其特征在于媒介體復合修飾劑是用硒雜二茂鐵乙腈溶液、表面活性劑水溶液和Nafion水溶液混合制備得到。

3.根據權利要求2所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極，其特征在于所述的表面活性劑為聚乙烯基吡咯烷酮、司班60、吐溫20或OP中的一種，質量百分含量為媒介體復合修飾劑的2.7％～12.5％。

4.根據權利要求2所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極，其特征在于所述的Nafion水溶液中，Nafion質量百分含量為媒介體復合修飾劑的1.35％～8.33％。

5.根據權利要求1所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極，其特征在于所述的酶反應層由葡萄糖氧化酶、牛血清白蛋白與戊二醛交聯制備得到。

6.根據權利要求5所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極，其特征在于所述的酶反應層由體積比為1～3∶2～3∶1～2的葡萄糖氧化酶溶液、質量百分濃度為1％的牛血清白蛋白溶液和質量百分濃度為1％的戊二醛溶液混合制備得到；其中，葡萄糖氧化酶溶液是用pH?6.0～7.0的磷酸鹽緩沖溶液制成2000～2500活力單位/mL的葡萄糖氧化酶溶液；質量百分比濃度為1％的牛血清白蛋白溶液和質量百分比濃度為1％的戊二醛溶液分別用pH?6.0～7.0的磷酸鹽緩沖溶液配制。

7.一種權利要求1所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極的制備方法，包括電極的預處理，其特征在于該方法包括以下步驟：

a.在預處理后的玻碳電極表面滴加硒雜二茂鐵電子媒介體復合修飾劑，使其完全覆蓋玻碳電極，晾干，得到表面覆蓋電子媒介體硒雜二茂鐵層的玻碳電極；硒雜二茂鐵質量百分含量為媒介體復合修飾劑的8％～9.6％。

b.將葡萄糖氧化酶、牛血清白蛋白與戊二醛交聯后修飾在硒雜二茂鐵層上，在0～4℃下干燥18～24h。

8.根據權利要求7所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極的制備方法，包括電極的預處理，其特征在于該方法具體包括以下步驟：

a.在預處理后的玻碳電極表面滴加硒雜二茂鐵電子媒介體復合修飾劑，使其完全覆蓋玻碳電極，晾干，得到表面覆蓋電子媒介體層的玻碳電極；

該硒雜二茂鐵電子媒介體復合修飾劑是通過以下方法制備得到的：選用FcSeSeFc、FcSeCH₂SeFc、FcSe₃中的一種用乙腈配成硒雜二茂鐵乙腈溶液；將硒雜二茂鐵乙腈溶液、表面活性劑水溶液和Nafion水溶液混合；其中，硒雜二茂鐵質量百分含量為媒介體復合修飾劑的8％～9.6％；

b.將葡萄糖氧化酶溶于pH?6.0～7.0的磷酸鹽緩沖液中配成2000～2500活力單位/mL的葡萄糖氧化酶溶液；用pH?6.0～7.0的磷酸鹽緩沖溶液分別配制成質量百分比濃度為1％的牛血清白蛋白溶液和質量百分比濃度為1％的戊二醛溶液；

體積比為1～3∶2～3∶1～2的葡萄糖氧化酶溶液、1％牛血清白蛋白溶液與1％戊二醛溶液交聯后，滴加在已覆蓋電子媒介體層的玻碳電極上并使其完全覆蓋，將電極在0～4℃下干燥18～24h。

9.根據權利要求8所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極的制備方法，其特征在于所述的表面活性劑為聚乙烯基吡咯烷酮、司班60、吐溫20、OP中的一種，質量百分含量為媒介體復合修飾劑的2.7％～12.5％；所述的Nafion質量百分含量為媒介體復合修飾劑的1.35％～8.33％。

10.根據權利要求7或8所述的基于電子媒介體硒雜二茂鐵的葡萄糖電極的制備方法，其特征在于所述的玻碳電極的預處理是通過以下步驟：首先將玻碳電極拋光，再依次用粒徑為1.0μm、0.3μm和0.05μm的Al₂O₃水懸浮液拋光至鏡面，最后依次在體積濃度為40～60％的HNO₃水溶液、無水乙醇和蒸餾水中超聲洗凈。