[發明專利]一種檢測血中GCDCS和GCDCA的試劑盒

無效

• 申請號: 201110132331.7
• 申請日: 2011-05-21
• 公開（公告）號: CN102798672A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 孔宏偉;王曉琳;趙欣捷;王文昭;許國旺
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

技術領域

本發明涉及分析化學和醫學領域，是一種快速定量檢測血中3-硫酸甘氨鵝脫氧膽酸和甘氨鵝脫氧膽酸(GCDCS和GCDCA)的試劑盒，對人血液進行超高效液相色譜質譜聯用分析，以快速定量測定血中GCDCS和GCDCA的濃度，用于肝癌的輔助診斷。?

背景技術

肝癌是常見的惡性腫瘤之一在惡性腫瘤死亡率中僅次于胃癌和食道癌而居第三位。肝癌主要和肝炎病毒感染以及肝硬化等疾病相關。肝癌的早期癥狀經常不明顯，多數病人無癥狀，體檢亦缺乏腫瘤本身的體征。因此肝癌發現時，患者大多已進入中晚期，這一階段肝癌缺乏有效治療手段。因此，肝癌的早期診斷非常重要，可使肝癌的五年生存率顯著性提高。隨著分子生物學的不斷發展，多種新型標志物不斷發現，有望提高肝癌的早期診斷率，改善治療效果。?

目前最常用的臨床肝癌血清標志物為甲胎蛋白(AFP)。然而AFP血清水平在診斷肝癌時存在敏感性和特異性較低的缺點，單獨用于確診時的檢出率一般只有50％-75％左右，對早期肝癌的診斷率更低。?

膽汁酸是由肝實質細胞在線粒體中以膽固醇為原料直接合成的存在于膽汁中的一大類膽烷酸的總稱。膽汁酸一直被認為僅具有促進脂類的消化和吸收、維持膽汁酸分泌的動態平衡、抑制膽固醇在膽汁中析出沉淀而形成膽結石以及在病毒性肝炎和膽道堵塞等疾病中輔助診斷等生理功能。近年來，膽汁酸越來越引起人們的重視，其被認?為是一種多功能的重要信號分子，在能量動態平衡(文獻1：Watanabe，M.；Houten，S.M.；Mataki，C.；Christoffolete，M.A.；Kim，B.W.；Sato，H.；Messaddeq，N.；Harney，J.W.；Ezaki，O.；Kodama，T.；Schoonjans，K.；Bianco，A.C.；Auwerx，J.Nature?2006，439，484-489.文獻2：Baxter，J.D.；Webb，P.Nature?2006，439，402-403.)、磷脂代謝(文獻3：Martin，F.P.J.；Dumas，M.E.；Wang，Y.L.；Legido-Quigley，C.；Yap，I.K.S.；Tang，H.R.；Zirah，S.；Murphy，G.M.；Cloarec，O.；Lindon，J.C.；Sprenger，N.；Fay，L.B.；Kochhar，S.；van?Bladeren，P.；Holmes，E.；Nicholson，J.K.Molecular?Systems?Biology?2007，3，16.文獻4：Bilz，S.；Samuel，V.；Morino，K.；Savage，D.；Choi，C.S.；Shulman，G.I.American?Journal?of?Physiology-Endocrinology?and?Metabolism?2006，290，E716-E722.)、糖代謝(文獻5：Nguyen，A.；Bouscarel，B.Cellular?Signalling?2008，20，2180-2197.文獻6：Brinton，E.A.Diabetes?Obesity&Metabolism?2008，10，1004-1011.)以及細胞增殖或凋亡(文獻7：Metalli，V.D.；Mancino，M.G.；Mancino，A.；Torrice，A.；Gatto，M.；Attili，A.F.；Alpini，G.；Alvaro，D.Digestive?and?Liver?Disease?2007，39，654-662文獻8：Ramalho，R.M.；Viana，R.J.S.；Low，W.C.；Steer，C.J.；Rodrigues，C.M.P.Trends?in?Molecular?Medicine?2008，14，54-62.)等整合調節中起重要調節作用。?

我們通過代謝組學研究，基于超高效液相色譜-質譜分析平臺分離檢測健康婦女、良性肝病和肝癌病人血清中的代謝物小分子，利用統計學手段分析比對三組人群的代謝差異，發現在血清中3-硫酸甘氨鵝脫氧膽酸和它的前體甘氨鵝脫氧膽酸的比值跟肝癌有關(專利申請號：201010175559.5)。?

目前尚無文獻報道高效定量檢測人體內的3-硫酸甘氨鵝脫氧膽酸和甘氨鵝脫氧膽酸的方法。?

本發明提供了一種用于快速定量檢測血中3-硫酸甘氨鵝脫氧膽酸和甘氨鵝脫氧膽酸的試劑盒，該試劑盒對樣品無需復雜的預處理過程，而且定量準確、重復性好、穩定性高。?

發明內容