[發明專利]一種艾葉中倍半萜內酯化合物的提取方法及其應用

無效

• 申請號: 201110131147.0
• 申請日: 2011-05-19
• 公開（公告）號: CN102250106A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: 藍閩波;張艷紅;袁慧慧;趙紅莉;郭晶;包曉麗;王呈仲;王金威
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 上海三和萬國知識產權代理事務所 31230
• 代理人: 朱小晶

【技術領域】

本發明涉及醫學技術領域，具體地說，是一種艾葉中倍半萜內酯化合物的提取方法及其應用。

【背景技術】

腫瘤已經成為危害人類健康最嚴重的疾病之一，我國每年癌癥的發病率為200萬，約有140萬人死于癌癥且有增加的趨勢。近半個世紀以來，腫瘤的發病率逐年上升，目前已成為多發病、常見病，成為居民死亡的主要原因之一，嚴重威脅著人民的健康。腫瘤學在醫學領域的地位越來越重要，尋找和開發毒副作用低、選擇性高的抗腫瘤藥物已經成為亟待解決的問題。

艾葉為菊科蒿屬植物艾(Artemisia?argyi?Levl.et?Vant.)的葉。艾葉性溫味苦、辛，歸肝、脾、腎經，具有散寒止痛，溫經止血和理氣安胎等功效。艾葉作為抗腫瘤治療藥物開始于上世紀70年代，以煎劑、注射液和片劑入藥，對胃癌、乳腺癌有一定的緩解癥狀的作用并能控制病情的惡化。Shoemaker等對幾種植物的體外活性篩選表明：艾葉水提物對9種不同腫瘤細胞(A549、LLC、Panc-1、Panc02、PC-3、LNCaP、MCF-7、MCNeuA、HuMEC)均表現出較強的抑制活性(Phytotherapy?Research，2005.19(7)：649-651)。劉延慶等發現野艾、蘄艾乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物均具有不同程度的抑制人癌細胞株SGC-7901、SMMC-7721、Hela細胞的作用，并有明顯的量效關系(中藥材，2006.29(11)：1213-1215)。本實驗組之前對艾葉水提物進行的抗腫瘤活性篩選發現艾葉多糖對小鼠移植性Lewis瘤、Heps瘤、Eac瘤有顯著抑制作用(EC₅₀＜100mg/kg)(CN?1962698A)。

艾葉中的倍半萜內酯類化合物是艾葉中具有抗腫瘤作用的主要藥效成分。日本人上里新一等從艾葉醇提物中分離出抗腫瘤活性很強的三個倍半萜內酯的光學異構體(JP?07206839)。另外，Lee(J.Org.Chem.2002，67：7670-7675)等從艾葉中分離得到一系列倍半萜內酯的二聚物都具有很強的法尼基蛋白抑制活性，提示其抗癌活性與這一機制有關。

申清人在對艾葉粗提物進行抗癌活性評價后，對具有抗腫瘤活性的組分進行分離，從艾葉中分離得到含氯倍半萜內酯Chloroklotzchin，并發現該化合物具有很強的體外抗腫瘤活性。

【發明內容】

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種艾葉中倍半萜內酯類化合物的提取方法及其應用。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種艾葉中倍半萜內酯化合物的提取方法，具體步驟為，

(1)粉碎過的艾葉，加入8～10倍量(w/v)的60％～100％(v/v)乙醇回流提取1～3次，每次1～3小時，減壓蒸餾除去乙醇，得到艾葉醇提物；

(2)將艾葉醇提物經大孔吸附樹脂柱層析，用不同濃度的乙醇/水體系洗脫，將70％～100％(v/v)乙醇洗脫部分收集并濃縮，得到膏狀固體；

(3)將膏狀固體用50％(v/v)乙醇溶解后，上聚酰胺柱，6～10倍柱體積的去離子水洗脫，收集水洗脫部分并濃縮；

(4)將水洗脫部分濃縮后，上硅膠柱，以石油醚/乙酸乙酯(3∶1～1∶4)進行梯度洗脫，洗脫后得到的各組分化合物利用TLC定性鑒定并合并相同組分；進一步利用乙醇重結晶進行純化，得到倍半萜內酯化合物；本發明所涉及的化合物Chloroklotzchin的結構式為：

本發明的另一個目的是提供一種用于治療腫瘤的藥物組合物，其包括按上述提取方法制得的化合物與藥學可接受的載體；

所述藥學上可接受的載體是指藥學領域常規的藥物載體，如，稀釋劑、賦形劑如水，填充劑如淀粉、蔗糖等；粘合劑如纖維素衍生物、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；潤濕劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂和聚乙二醇等。另外，還可以在組合物中加入其它輔料如香味劑、甜味劑等。

本發明可以組合物的形式通過口服、鼻吸入、直腸或者腸胃外給藥的方式施用于患者。用于口服時，可將其制成常規固體制劑如片劑、顆粒劑、膠囊等，制成液體制劑如水懸浮劑或其他液體制劑如酊劑、糖漿等；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、粉針劑等。

本發明藥物組合物的各種劑型可以按照藥學領域的常規方法制備，如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。

與現有技術相比，本發明的積極效果是：