[發明專利]一種治療痛經的中藥組合物的檢測方法

無效

• 申請號: 201110129359.5
• 申請日: 2011-05-18
• 公開（公告）號: CN102788862A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 付立家;付建家
• 申請（專利權）人: 北京亞東生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種治療痛經的中藥組合物的檢測方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和含量測定方法：

所述組合物由如下原料藥制成：

丹參??50-90重量份??白芍??50-90重量份??醋炙香附??15-45重量份

醋炙延胡索?30-70重量份??炒川楝子?15-45重量份??小茴香?10-30重量份蜜炙甘草?20-50重量份：

鑒別方法包括如下方法：

鑒別：

A、取組合物制劑研細，加乙醚超聲處理，濾過，殘渣加醋酸乙酯溶解，作為供試品溶液；另取丹參酮II?A對照品，加醋酸乙酯制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以16-22∶1的為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

B、取組合物制劑研細，加乙醇超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用水飽和的正丁醇提取，用水洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加乙溶解，加中性氧化鋁，在水浴上攪勻干燥，置于已處理好的中性氧化鋁柱上，以1-2∶1-2醋酸乙酯-甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以35-45∶3-8∶8-12∶0.1-0.5的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

C、取組合物制劑，研細，加石油醚超聲處理，濾過，濾液揮干，殘渣加醋酸乙酯溶解，作為供試品溶液；另取a-香附酮對照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液分別點于同一硅膠薄層板上，以85-98∶3-7∶3-7的苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同熒光、顏色的斑點；噴以2，4-二硝基苯肼乙醇試液，放置片刻，斑點漸變為橙紅色；

D、取組合物制劑，研細，加甲醇超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干；殘渣加水溶解，加濃氨試液調PH值為10，用乙醚提取，蒸干乙醚，殘渣加甲醇溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8-13∶6-10的石油醚-醋酸乙酯為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內，預飽和后，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

含量測定包括如下方法：

E、丹參酮IIA的定量檢測

照高效液相色譜法：色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以85-95∶8-12甲醇-水為流動相；檢測波長為270nm；理論板數按丹參酮II?A峰計算，應不低于2000；對照品溶液的制備：精密稱取丹參酮IIA對照品加甲醇得每1ml中含丹參酮IIA的溶液16μg；供試品溶液的制備：取組合物制劑研細，加入甲醇超聲處理20-40分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；測定法：分別精密吸取供試品溶液各5μl，對照品溶液15μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品含丹參以丹參酮IIA的量應不低于0.75mg/g；其中甲醇-水的比例優選90∶10；

F、芍藥苷的定量檢測

照高效液相色譜法：色譜條件與系統適用性試驗：八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；10-20∶80-90的乙腈-水為流動相；檢測波長為230nm；理論板數按芍藥苷峰計算，應不低于2500；

對照品溶液的制備：稱取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的制備：取組合物制劑研細，40-60％乙醇超聲處理15-35分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；測定法，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于鑒別A中苯-醋酸乙酯的比例優選19∶1。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于鑒別B中所述氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸的比例優選為：40∶5∶10∶0.2。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于鑒別C中所述苯-醋酸乙酯-冰醋酸優選為：92∶5∶5。