[發明專利]藍莓菌根真菌（晶粒鬼傘）及其分離方法和用途

無效

• 申請號: 201110128890.0
• 申請日: 2011-05-18
• 公開（公告）號: CN102220246A
• 公開（公告）日: 2011-10-19
• 發明（設計）人: 陶承光;楊濤;肇瑩;肖軍;王娜;龔娜;陳珣;王紅;賈東貝;楊鎮
• 申請（專利權）人: 遼寧省農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P21/00;A01P7/04;C12R1/645
• 代理公司: 沈陽智龍專利事務所(普通合伙) 21115
• 代理人: 宋鐵軍

1.一種藍莓菌根真菌，其特征在于：該真菌分類命名：晶粒鬼傘（Coprinus?micaceus），在國家知識產權局指定的保藏單位保藏，保藏日期：2010年8月18號，保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?No.4063，保藏代號為：MF002。

2.根據權利要求1所述的藍莓菌根真菌，其特征在于：該真菌的擴增DNA序列如下：

AGGGGGAATGGAATACCTATGGTGTCTTGGTTGTAGCTGGCTCCTCGGAGCATTGTGCACGCCCGCCATTTTTATCTATCCACCTGTGCACCGACTGTAGGTCTGGATGACTCTCGTGCTCTCTGAGTGCGGATGCGAGGATTGCCCTTCAACTCGGAGGTGTCTCTCCTCGAATTTCCAGGCTCTACGTCTTTTTACACACCCCAAAAGCATGATATAGAATGTAGTCAATGGGCTTGATCGCCTATAAAACACTATACAACTTTCAGCAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCTCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTCTCAACCTCACCCGTTTTCTGAACGGTTCTCCGAGGCTTGGATTGTGGGGGTTTGTGCAGGCTGCCTCAGCGCGGTCCGCTCCCCTGAAATGCATTAGCGAGTTCGTACTGAGCTCCGTCTATTGGTGTGATAATTATCTACGCCGTGGACAGGGTTTAGACTCGCTTCTAACCGTCCGCAAGGACAATACCTTTGTCAATTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGA。

3.一種如權利要求1所述藍莓菌根真菌的分離方法，其特征在于：從野生越橘屬植物的根際獲得菌根真菌，步驟如下：

（1）清洗：取新鮮完整的健康野生藍莓的根，用自來水沖洗一小時，然后用無菌水沖洗2～4次，將根轉移到滅過菌的玻璃平皿中待用；

（2）消毒：將步驟（1）中待用的根放入體積分數70%的酒精溶液中滅菌20～40s，無菌水沖洗3次，然后用體積分數0.1%的升汞溶液消毒1～3min，沖洗3次，再立即放入質量百分比為1%的無菌硫化鈉水溶液中浸1～3min，無菌水沖洗3次，無菌濾紙吸干待用；

（3）培養：將步驟（2）消毒后待用的根切成0.5～1cm長的小段，置于PDA培養基平板上，25～28℃下恒溫倒置培養，設5個重復培養皿，每個培養皿接3個小段；

（4）純化：待菌絲生長5～7天后，用接種環挑取不同形態菌落邊緣的菌絲移至新的無菌培養基上繼續純化培養，直至每一個平板培養基中只含有單一菌落，得到4個菌落；

（5）篩選優勢菌株：將步驟（4）中得到的藍莓菌根真菌菌落繼續接種到瓶外生根的藍莓苗，觀察藍莓接菌后的生長，將對藍莓苗促進作用最好的菌株篩選出來，即為權利要求1所述的藍莓菌根真菌。

4.根據權利要求3所述的一種藍莓菌根真菌的分離方法，其特征在于：步驟（3）中將步驟（2）消毒后待用的根切成0.8cm長的小段，置于PDA培養基平板上，25℃下恒溫倒置培養。

5.一種如權利要求1所述的藍莓菌根真菌的用途，其特征在于：該藍莓菌根真菌用于促進藍莓各個生長階段的生長、防蟲害、防冷害以及提高產量。