[發明專利]伯克氏菌的制備及其在高效溶磷微肥中的應用

無效

• 申請號: 201110128569.2
• 申請日: 2011-05-18
• 公開（公告）號: CN102226161A
• 公開（公告）日: 2011-10-26
• 發明（設計）人: 吳海燕;金榮德;劉淑霞;范作偉;高星愛;陳寶玉;劉春光;于雷;蓋嘉慧;李明姝;王洪君;王巍巍
• 申請（專利權）人: 吉林省農業科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05G3/00;C12R1/01
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 王薇

1.伯克氏菌的制備，其特征在于具體步驟如下：土壤樣本的采集：（1）采集種植玉米的貧磷土壤放入塑料袋中，置于4℃的冰箱保存；（2）菌株（伯克氏菌）的分離及篩選，篩選培養基：葡萄糖10.0克，(NH₄)₂SO₄?0.5克，NaCl?0.3克，KCl?0.3克，MgSO₄·7H₂O?0.3克，FeSO₄·7H₂O?0.03克，MnSO₄·4H₂O?0.03克，Ca₃(PO₄)₂?10.0克，酵母粉?0.5?g?瓊脂粉?15?g，?PH值7.0～7.2，水?1000?mL；在121℃條件下滅菌20min然后制作平板固體培養基備用；將土壤樣品在無菌條件下分別進行10倍梯度稀釋，制成10^－1～10^－6系列稀釋液，然后分別取0.1ｍＬ不同稀釋度的樣品以平板劃線法涂布于以上制作的篩選平板培養基，28℃培養３ｄ后，選取產生透明圈（溶磷圈）較大的菌落轉接到溶磷平板培養上，菌株純化后，挑出，斜面保藏；（3）伯克氏菌溶磷能力的測定:以上述溶磷培養基為主要成分制作液體培養基，然后分別量取100?mL分裝在250?mL三角瓶中，加入1?mL已培養24?h的菌液，28°C~30°C，120?r/min搖床培養，分別在48?h、72?h、96?h及120?h，取上清液進行鉬銻抗比色法測定菌株溶解無機磷能力；（4）菌株的鑒定：對篩選獲得的菌株進行了DNA測序和16S?rRNA系統發育樹構建，鑒定為伯克氏菌。

2.根據權利要求1所述的伯克氏菌的制備，其特征在于所述的伯克氏菌的序列為

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?Score?=?2728?bits?(1477),??Expect?=?0.0?Identities?=?1489/1495?(99%),?Gaps?=?0/1495?(0%)

?Strand=Plus/Plus。

3.伯克氏菌在溶磷微肥中的應用。