[發明專利]半夏屬植物的組培快繁方法

無效

• 申請號: 201110111047.1
• 申請日: 2011-04-29
• 公開（公告）號: CN102150624A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 陳集雙;賈明良;張本厚;何珣;劉學威
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230
• 代理人: 毛依星

1.一種半夏屬植物的組培快繁方法，包括外植體選材料的選擇和處理、增殖培養、生根及塊莖生成、煉苗及離體塊莖移栽的步驟，其特征在于在間歇浸沒培養反應器進行所述的增殖培養和生根及塊莖生成步驟。

2.根據權利要求1所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于具體包括以下步驟：

（1）外植體材料選擇與處理：選擇傳統組培方法得到的半夏屬植物無菌苗或經過消毒滅菌后自然生長的種苗，取其外植體并切出傷口備用；

（2）增殖培養：在無菌狀態下，將步驟（1）得到的處理好的外植體接種到預先滅好菌的間歇浸沒培養反應器中進行增殖培養；

（3）生根及塊莖生成：增殖培養結束后，在無菌條件下將間歇浸沒培養反應器中的增殖用培養基替換為生根及塊莖生成培養基進行組織培養得到種苗；

（4）煉苗及離體塊莖移栽：將組織培養得到的種苗取出后，直接移栽到珍珠巖中。

3.根據權利要求2所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的步驟（1）的外植體處理方法為：葉片外植體取完全展開的葉片，將其橫切出傷口以利于愈傷組織的誘導；葉柄外植體取葉柄中部切為0.5~2?cm長度；叢生芽及塊莖外植體切出傷口以利于愈傷組織的誘導。

4.根據權利要求3所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的葉柄外植體取葉柄中部切為1cm長度。

5.根據權利要求2所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的步驟（2）的間歇浸沒培養反應器的參數設置為：浸沒頻率1~20?min/2h；培養時間：15~30?d；培養用培養基配方為Ms+1.0?mg/L?6-BA+0.02?mg/L?NAA+30?g/L蔗糖，pH5.8；培養條件為：光照強度1500-2000?lux，光照12?h/d，溫度25±1℃。

6.根據權利要求5所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的間歇浸沒培養反應器的參數設置為：浸沒頻率5?~10?min/2h；培養時間：20~25d。

7.根據權利要求2所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的步驟（3）的生根及塊莖生成培養基為Ms+1.0?mg/L?6-BA+0.2?mg/L?NAA+45?g/L蔗糖，pH5.8；設置間歇浸沒培養參數為：浸沒頻率1~20min/4h；培養時間20~40d；培養條件為：光照強度1500-2000?lux，光照12?h/d，溫度25±1℃。

8.根據權利要求7所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的設置間歇浸沒培養參數為：浸沒頻率5~10?min/4h；培養時間25~30?d。

9.根據權利要求2所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的間歇浸沒培養反應器的容積大小為1~10?L。

10.根據權利要求7所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的間歇浸沒培養反應器的容積大小為3~5L。

11.根據權利要求1至10之一所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的半夏屬植物為中藥半夏屬(Pinellia?Tenore)的植物。

12.根據權利要求11所述的半夏屬植物的組培快繁方法，其特征在于所述的中藥半夏屬(Pinellia?Tenore)是三葉半夏(P.?ternata?(Thunb.)?Breit.)、水半夏（P.?cordata?N.?E.?Brown）、盾葉半夏（P.?peltata?Pei）、天南星（P.?pedatisecta?Schott）或犁頭尖（Typhonium?divaricatum?(L.)?Decne.）。