[發(fā)明專利]一種用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201110107554.8 | 申請(qǐng)日： | 2011-04-27 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN102417897A | 公開（公告）日： | 2012-04-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 蘇保榮;徐鳳彩;程京燕;胡永剛 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 珠海市御品堂生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N9/02 | 分類號(hào)： | C12N9/02 |
| 代理公司： | 廣東秉德律師事務(wù)所 44291 | 代理人： | 楊煥軍;田學(xué)東 |
| 地址： | 519000 廣東省*** | 國(guó)省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 解法 制備 乙醛 脫氫酶 工藝 | ||
1.一種用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝，其特征在于，包括以下步驟：
1)緩沖溶液：將CBP液和α-淀粉酶液按體積比為5∶1-2混合均勻，得緩沖溶液；取啤酒酵母和所述緩沖溶液置反應(yīng)罐中，攪拌均勻；
2)在攪拌下調(diào)pH值至7-8，在42-50℃條件下攪拌反應(yīng)22h-28h，得酶解啤酒酵母液；
3)上述酶解啤酒酵母液經(jīng)離心、超濾濃縮，得濃縮液；
4)上述濃縮液經(jīng)干燥得乙醛脫氫酶酶粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝，其特征在于，所述步驟1)的α-淀粉酶液由以下方法制得：混合步驟3)的殘?jiān)筒襟E4)的殘?jiān)没旌衔铮瑢⑺龌旌衔锛尤雙H6.0-pH7.0、0.01mol/L磷酸緩沖液，混合物的質(zhì)量g與磷酸緩沖液的體積ml之比為1∶2，攪拌0.5h，經(jīng)離心、超濾濃縮，得α-淀粉酶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝，其特征在于，步驟2)中的所述啤酒酵母為廢棄啤酒酵母泥，即生產(chǎn)啤酒后過濾出的啤酒酵母。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝，其特征在于，步驟1)中，所述啤酒酵母的質(zhì)量g與緩沖溶液的體積ml之比為1∶1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝，其特征在于，所述步驟3)具體包括：
301)上述酶解啤酒酵母液抽入離心機(jī)，經(jīng)1200-1500r/min常溫離心收集上清液，殘?jiān)鼔簽V再收集上清液，合并兩次上清液，殘?jiān)Ａ魝溆茫?/p>
302)上述合并上清液抽入離心機(jī)，經(jīng)14000-17000r/min常溫離心收集上清液，殘?jiān)Ａ魝溆茫?/p>
303)將步驟302)所得的上清液經(jīng)超濾濃縮，得濃縮液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醛脫氫酶的工藝，其特征在于，所述步驟4)具體為，上述濃縮液轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥，或用-15℃以下的冷丙酮洗滌脫水干燥，得乙醛脫氫酶酶粉。
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