[發(fā)明專利]一種大規(guī)模分離純化艾塞那肽的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110105976.1
• 申請日: 2011-04-27
• 公開（公告）號: CN102219849A
• 公開（公告）日: 2011-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐紅巖;張德志;張宏偉;楊翼
• 申請（專利權(quán)）人: 濱海吉爾多肽有限公司;無錫亞肽生物科技有限公司;吉爾生化（上海）有限公司
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K1/20;A61P3/10
• 代理公司: 上海浦東良風(fēng)專利代理有限責(zé)任公司 31113
• 代理人: 張勁風(fēng)

1.一種大規(guī)模分離純化艾塞那肽的方法，包括以下步驟：

1）艾塞那肽粗品溶解在醋酸乙腈水溶液中，超聲處理，濾膜過濾，取濾液待用；

2）?使用高效液相色譜儀器對過濾后的粗品進(jìn)行分離純化：通過DAC-HB200制備動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱，流動(dòng)相A為質(zhì)量百分濃度0.1%-0.3%醋酸水溶液，流動(dòng)相B為質(zhì)量百分濃度0.1%-0.3%醋酸乙腈溶液，進(jìn)行梯度洗脫分離純化，采用紫外檢測器對樣品進(jìn)行檢測，分段收集目的峰值的肽溶液；

3）將分離純化后的純度98.5%以上高濃度目的肽溶液進(jìn)行減壓旋蒸濃縮，濃縮液收集待用；

4）將濃縮液經(jīng)過反相動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱采用離子交換法轉(zhuǎn)成醋酸鹽；

5）將轉(zhuǎn)好醋酸鹽合格產(chǎn)品進(jìn)行減壓旋蒸濃縮、冷凍干燥，得到白色絮狀粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測合格即為最終產(chǎn)品。

2.如權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模分離純化艾塞那肽的方法，其特征在于：DAC-HB200動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱內(nèi)裝固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠的反相硅膠。

3.如權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模分離純化艾塞那肽的方法，其特征在于：醋酸乙腈水溶液配置時(shí)體積比：醋酸∶乙腈∶水=1∶5∶40。

4.如權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模分離純化艾塞那肽的方法，其特征在于：步驟2）中的流動(dòng)相梯度選擇0到40分鐘?A∶B由?（90～70）∶（10～30?）到（10～30）∶（90～70）。

5.如權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模分離純化艾塞那肽的方法，其特征在于：步驟4）中將濃縮液經(jīng)過反相動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱完成離子交換轉(zhuǎn)成醋酸鹽，所用到的流動(dòng)相為20～50mmol醋酸緩沖鹽體系。