[發(fā)明專(zhuān)利]一種篩選治療神經(jīng)退行性疾病藥物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110103946.7
• 申請(qǐng)日: 2011-04-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102279201A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張翼;張瑞潔;劉佳佳;彭勇;蘇芳芳;孫志方;戴旋
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N23/22
• 分類(lèi)號(hào): G01N23/22;G01N27/26
• 代理公司: 南昌新天下專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 36115
• 代理人: 李炳生

1.一種篩選治療神經(jīng)退行性疾病藥物的方法，其特征在于，利用到原子力顯微鏡(AFM)與電化學(xué)，通過(guò)分析AFM形貌圖和電化學(xué)工作曲線圖來(lái)對(duì)潛在藥物進(jìn)行篩選和評(píng)估；其具體步驟如下：

①．將Aβ₄₂用PBS配成濃度為25uM的溶液放置37℃的恒溫水浴中孵化2天，制樣；

將0.25?mgAβ₄₂溶解于220μL的NaOH(5mM)溶液中，在超聲環(huán)境中靜置1?min，室溫放置10min，移至離心管中，在0℃的環(huán)境中，進(jìn)行13000?rpm的高速離心30?min，移取上清液分裝至離心管中，放置冰箱零下20℃下儲(chǔ)藏備用，儲(chǔ)備溶液濃度為250μM；

使用時(shí)加入與NaOH等量等濃度的HCl將其中和成為中性溶液，在用濃度為10mM的PBS（PH=7.4）稀釋為濃度為25μM的Aβ溶液，放置恒溫水浴中孵化2天，用原子力顯微鏡對(duì)其進(jìn)行表征；

②．在①的基礎(chǔ)上加載藥物，用原子力顯微鏡對(duì)其進(jìn)行液相原位表征；

③．在做①的同時(shí)，另作一份①中的平行溶液以Fc-KLVFFKKKKKK（濃度為25μM）為信標(biāo)，放入37℃的恒溫水浴中孵化，并隔段時(shí)間利用電化學(xué)方法觀察研究Aβ的自聚集；

④．在③的基礎(chǔ)上，加載藥物，利用電化學(xué)方法研究藥物與Aβ自聚體的相互作用，此時(shí)，將環(huán)境調(diào)節(jié)為接近人體生理環(huán)境，并在整個(gè)過(guò)程中進(jìn)行保持。