[發明專利]金屬離子-蛋白質/高分子水相-水相混懸劑的制備方法無效

申請號：	201110099412.1	申請日：	2011-04-20
公開（公告）號：	CN102178648A	公開（公告）日：	2011-09-14
發明（設計）人：	袁偉恩;金拓;吳飛;胡振華;鄭瑞媛;馮艷	申請（專利權）人：	上海交通大學
主分類號：	A61K9/10	分類號：	A61K9/10;A61K38/19;A61K38/21;A61K38/27;A61K47/02;A61K47/32;A61K47/34;A61K47/36
代理公司：	上海交達專利事務所 31201	代理人：	王錫麟;王桂忠
地址：	200240 ***	國省代碼：	上海;31
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摘要：
搜索關鍵詞：	金屬離子蛋白質高分子水相混懸劑制備方法
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及的是一種基因重組技術領域的方法，具體是一種金屬離子-蛋白質/高分子水相-水相混懸劑的制備方法。

背景技術

基因重組技術用于治療蛋白的表達和生產的20多年以來，到目前為止，已有30多個蛋白藥物產品投入臨床使用，近200個在審批和研發過程中，涌現出一批諸如安進(Amgen)、基因技術(Genentech)等一批新的大型醫藥公司。相對于蛋白大分子藥物本身的快速發展，其劑型技術進展緩慢。一方面，蛋白大分子藥物口服不吸收、體內半衰期短，需要注射給藥；另一方面，許多何爾蒙、細胞因子類的蛋白藥物藥物治療周期長，長期而頻繁地注射成為必須，也影響患者順應性的主要原因。緩釋蛋白藥物的劑型的研發，由于在制備微粒過程導致活性的損失諸如W/O/W法等。發展制備具有活性的微粒勢在必行。

經過對現有技術的檢索發現，Stenekes等人利用修飾的葡聚糖和PEG水相制備混懸液，但是非常不穩定，一旦停止攪拌就分相的報道，如Stenekes.R.J.H.，Franssen.O.，van?Bommel.E.M.G，在國際藥劑學雜志上發表了Crommelin.J.A.D.，Hennink.W.E.The?use?of?aqueouse?PEG/dextran?phase?separation?for?the?preparation?of?dextran?microspheres.《利用聚乙二醇和葡聚糖相分離法制備微球》International?Journal?of?Pharmaceutics，1999，183：29-32，而葡聚糖和PEG是常用來蛋白藥物的凍干保護劑和分離純化蛋白的試劑。到目前還未見在水溶性的環境下，不用表面活性劑在高分子水溶液中制備定的蛋白質藥物-金屬水相-水混懸劑的方法報道。

發明內容

本發明針對現有技術存在的上述不足，提供一種金屬離子-蛋白質/高分子水相-水相混懸劑的制備方法，得到的蛋白質藥物和金屬鹽水溶液在水溶性的高分子水溶液形成混懸劑，在室溫至少可以穩定一星期(不用任何外界作用，都不分層)。該混懸劑可以用來制備穩定的蛋白質顆粒和保持蛋白質的生物活性等作用，還可以用來作為口服或注射用藥等。

本發明是通過以下技術方案實現的，本發明首先將蛋白質、高分子溶液和金屬鹽混合后混合分散為混懸劑，然后對混懸劑進行預凍，然后凍干以除去水相，得到金屬離子-蛋白質/高分子干燥的樣品，該樣品重新加水可以得到具有活性的蛋白藥物的混懸劑。

所述的蛋白質是指：神經營養因子、干擾素或人生長激素；

所述的高分子溶液是指：聚乙二醇(PEG)溶液、聚維酮(PVP)溶液、聚乙烯醇(PVA)或葡聚糖(Dex)溶液；

所述的金屬鹽是指：Zn(AC)₂·2H₂O、ZnCl₂、或ZnSO₄；

蛋白質的用量為總液體混懸劑質量的0.1-10％，鋅鹽占0.01-5％，和高分子水溶液占85-99.89％。

所述的聚乙二醇的分子量為2000-22000；

所述的葡聚糖的分子量為1000-5000000；

所述的聚維酮的分子量為12000-90000；

所述的聚乙烯醇的分子量為20000～200000；

所述的高分子溶液的百分比濃度1-30％；

所述的混合分散是指：采用搖晃、超聲、勻質化、渦旋或離心的方式進行分散，

所述的離心是指：采用離心機在12000rpm環境下處理5min并去除上清液，重復該處理三次。