[發明專利]一種油菜多目標性狀的快速聚合育種方法

無效

• 申請號: 201110097939.0
• 申請日: 2011-04-19
• 公開（公告）號: CN102224801A
• 公開（公告）日: 2011-10-26
• 發明（設計）人: 浦惠明;龍衛華;胡茂龍;戚存扣;張潔夫;陳松;高建芹;陳新軍;陳鋒;顧慧;付三雄;傅壽仲
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/08
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

1.一種油菜多目標性狀的快速聚合育種方法，包括步驟：

A、多目標性狀的異地組裝與聚合：選擇需要聚合的優異育種目標性狀，冬季在當地溫室先配制具有兩個性狀的單交組合，當年異地夏繁各單交組合，并配制成具有多個親本的復式雜交組合，對多目標性狀的親本按育種需要進行組裝與聚合；

B、目的基因型的快速固定與純合：秋播將多親本復式雜交組合F₁在當地油菜育種田直播種植，次年春油菜初花期取F₁植株幼蕾進行小孢子苗培養，秋季將單倍體小孢子苗用2%秋水仙堿溶液浸泡根部30min后栽入盆缽，活棵后長至5-6葉期移栽到大田，獲得雙單倍體DH株系群體；

C、聚合性狀的有效鑒定與篩選：對DH株系按目標性狀進行田間和室內鑒定、篩選，或對目標性狀進行分子標記輔助選擇，選育聚合了多個目標性狀的育種新材料。

2.根據權利要求1所述的方法在選育甘藍型油菜矮桿、高油的CMS保持系方面的應用，其特征在于：?

A：當年12月下旬在當地將已通過春化的細胞質雄性不育保持系寧B7和高含油量品系HOC2、矮桿品系APL03從油菜育種直播大田移栽到溫室進行加代繁殖，使油菜在溫室的開花期提前到第2年的2月上旬，油菜開花后分別配制寧B7×HOC2和寧B7×APL03兩個單交雜交組合，3月中旬收獲F₁種子；同年3月底至4月初到異地加代夏繁F₁，正常春播，7月底8月初油菜開花期配制(寧B7×HOC2)×(寧B7×APL03)的多親本復式雜交組合，9月底收獲復式雜交F₁種子，返回當地正常秋播；

B：秋播將多親本復式雜交組合（寧B7×HOC2）×（寧B7×APL03）F₁在當地油菜育種田直播種植，第3年春油菜初花期取F₁植株幼蕾進行小孢子苗培養：于每日上午7時摘取剛開放第一朵花的花序，用吸水紙濕潤處理后置于4℃恒溫冰箱24h，次日挑選長度為4.0mm-5.0mm的花蕾用70％酒精浸泡30s，1％升汞表面消毒10min，無菌水沖洗3次，每次沖洗2min，將消毒花蕾置于無菌玻璃管中，加B₅提取液1ml，用玻璃棒沿管壁將花蕾搗碎擠出小孢子，經400目濾膜過濾，1000rpm/min離心5min，去除上清液后再加入B₅提取液懸浮小孢子，復重1次，去除上清液，加入添加了質量比13％蔗糖的NLN培養基轉入三角瓶中，32℃熱激培養24h，25℃黑暗靜止培養,直至出現可見的小白點胚狀體時，轉至25℃恒溫搖床50r/min振蕩培養，待胚狀體長度達4mm-6mm時轉到B₅固體培養基上，25℃光照培養，每天光照時間16小時，直至成苗，當年秋季將單倍體小孢子苗用2%秋水仙堿溶液浸泡根部30min后栽入盆缽，活棵后長至5-6葉期移栽到大田，獲得雙單倍體DH株系群體；

C：第4年春DH株系油菜開花后選擇株高低于140cm的可育植株套袋自交，并與細胞質雄性不育系寧A7為母本測交鑒定恢保關系，油菜成熟后收獲全部套袋自交種子和測交F₁，父本自交種子用索氏法測定種子含油量，同年秋將F₁和相應的測交父本成對種植，次年春鑒定F₁育性和父本的植株高度、含油率性狀，選擇F₁表現雄性不育，測交父本株高低于140cm，含油率大于45%的DH株系單株，即為育成具有矮桿、高油和CMS保持特性的三個目標性狀聚合在一起的甘藍型油菜新材料。