[發(fā)明專利]一種福建山櫻花體細胞胚胎發(fā)生方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110097798.2 | 申請日： | 2011-04-19 |
| 公開（公告）號： | CN102217534A | 公開（公告）日： | 2011-10-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 施季森;張元莉;陳金慧;蘇倩;呂月良;陳璋 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京林業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務(wù)所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 邱興天 |
| 地址： | 210037 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 福建 櫻花 體細胞 胚胎 發(fā)生 方法 | ||
1.一種福建山櫻花體細胞胚胎發(fā)生方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）春季采集福建山櫻花的未成熟果實，先用流水沖洗2h，然后在無菌條件下切開種皮，取出兩片子葉和未成熟胚接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基，控溫23℃，培養(yǎng)半個月，得胚性愈傷組織；其中，誘導(dǎo)培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基，在其中附加：1.0~4.0mg/L?2,4-D、0.2~1.0mg/L?BA、500mg/L水解酪蛋白、10mg/L維生素C、30g/L蔗糖和6g/L瓊脂，pH5.8；
（2）將步驟（1）的胚性愈傷組織轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基，控溫23℃，暗培養(yǎng)至產(chǎn)生胚狀體；其中，增殖培養(yǎng)基采用MS或1/2MS培養(yǎng)基，在其中附加：0.5~1.0mg/L?2,4-D、0.2~0.5mg/L?BA、500mg/L水解酪蛋白、10mg/L維生素C、30g/L蔗糖和6g/L瓊脂，pH5.8；
（3）將步驟（2）的胚狀體轉(zhuǎn)入培育培養(yǎng)基，控溫22～27℃，光照12h??d－1，光照度為1200?lx，光培養(yǎng)至長出幼苗；其中，培育培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基，在其中附加：10mg/L維生素C、蔗糖30g/L和瓊脂6g/L，pH5.8；
（4）將步驟（3）的幼苗轉(zhuǎn)入生長培養(yǎng)基，培養(yǎng)至長成完整小苗；其中，生長培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基，在其中附加：10mg/L維生素C、蔗糖20g/L和瓊脂6g/L，pH5.8。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的福建山櫻花體細胞胚胎發(fā)生方法，其特征在于：步驟（1）中，誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的2,4-D的濃度為2.0~3.0mg/L。
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