[發明專利]核酸脂質體藥物制劑

無效

• 申請號: 201110094734.7
• 申請日: 2011-04-15
• 公開（公告）號: CN102727436A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 陳建新;李鐵軍;主輝;朱遠源
• 申請（專利權）人: 百奧邁科生物技術有限公司
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/18;A61K47/24;A61K47/28;A61K48/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

技術領域

本發明涉及一種核酸脂質體藥物制劑，其主要用于治療由基因的異常表達引起的相關疾病。

背景技術

近年來，許多類型的核酸被用于治療一些疾病，發展成為新一代的基因療法。這些核酸包括用于基因治療的DNA、質粒、用于核酸干擾（RNA?interference，RNAi）的小干擾核酸（small?interfering?RNA，siRNA）、反義分子、核酶、微小RNA（microRNA，miRNA）、antagomirs（反義寡核苷酸的一種，用于沉默內源性的miRNA）及適體。當開發這些核酸藥物時，就有必要制備一種既容易制備又容易傳遞到靶組織的藥物制劑。

發明內容

本發明的目的是提供一種既容易制備又容易傳遞到靶組織的藥物制劑，用于治療由基因的異常表達引起的相關疾病。

為了達到上述目的，本發明提供了一種核酸脂質體藥物制劑，其特征在于，含有陽離子脂質和核酸。所述的核酸脂質體藥物制劑的單分散粒徑為200納米以下。

上述核酸脂質體藥物制劑通過以下方式制備：將一種含有陽離子脂質的溶液及核酸水溶液混合，在此條件下陽離子脂質及核酸形成陽離子脂質核酸混合物，并在添加其他組分的情況下形成脂質體。混合物可由一種溶于有機溶劑（如乙醇和其易混溶的溶劑組成）的碳數大于6的陽離子脂質與siRNA水溶液混合而成。所得的混合物有確定的摩爾濃度，同時包含一定數量的由陽離子脂質產生的正電荷及一定數量的核酸中的核苷。包含有機陽離子脂質體的核酸混合物可立即作為藥物制劑使用或能冷凍保存備用，也可采用所屬領域的技術人員常用的方法進行化學加工。這種陽離子脂質復合物能夠用許多機械方法進行適當的處理，使其能夠成為固態或液態的核酸藥物。

與含有陽離子脂質的溶液混合在一起的核酸溶液，是一種典型的水溶液，而陽離子脂質通常溶解于一種有機溶劑中，如乙醇。所述的核酸是DNA、RNA、反義核酸、適體、antagomir、miRNA、質粒、干擾核酸、核酶及siRNA中的一種或兩種以上的混合物。陽離子脂質同核酸中核苷的比例通常為2～3:1（重量比）。本領域中技術應當理解為可用任何方法進行混合操作，如采用機械手段，如使用旋渦混合器或注射泵、攪拌器和T型管進行混合操作。

所述的陽離子脂質包括任何一種在所選pH值下，如生理pH值（pH約為7.0）能夠產生凈正電荷的脂質。本發明所使用的生理pH值指的是生物流體（如血液或淋巴液）的pH值及細胞區室（如內涵體、酸性內涵體及溶酶體中）的pH值。所述陽離子脂質，包括但不限于雙油基雙甲基氯化銨（N,N-dioleyl-N,N-dimethylammonium?chloride，DODAC）、N,N-二甲基-2,3-二油氧基丙胺（N,N-dimethyl-（2,3-dioleyloxy）propylamine，DODMA）、雙十八烷基二甲基溴化銨（N,N-distearyl-N,N-?dimethylammonium?bromide，DDAB）、1,?2-二油酰基-3-二甲基丙二醇胺（1,2-di-（9Z-octadecenoyl）-3-dimethylaminopropane，DODAP）、N-（N’,N’-二甲氨基乙基）氨甲酰基-膽固醇（3-（N-（N',N'-dimethylaminoethane）-carbamoyl）cholesterol，DC-Chol）、N,N-二甲基-N-羥乙基-N-（1,2-雙十四烷氧基）丙基溴化銨（N-（1,2-dimyristyloxyprop-3-yl）-N,N-dimethyl-N-?hydroxyethyl?ammonium?bromide，DMRIE）、1,2-二亞油氧基-N,N-二甲基丙胺（1,2-Dilinoleyloxy-N,N-?dimethylaminopropane，DLinDMA）和1,2-二亞麻氧基-N,N-二甲基丙胺（1,2-Dilinolenyloxy-N,N-dimethylaminopropane，DLenDMA）。以及在生理pH值下，帶正電或有一個正電荷的脂質：1,2-雙十四烷基-3-二甲基氨丙烷（1,2-dimyristoyl-3-dimethylaminopropane，DMDAP）、DODMA等等。這些脂質及類似物在申請號為08/316,399和專利號為5,208,036、5,264,618、?5,279,833?和5,283,185美國專利中有所描述。此外，其他商業化制備的陽離子脂質也適用于本發明。