[發明專利]一類羅丹明6G衍生物的應用

有效

• 申請號: 201110090721.2
• 申請日: 2011-04-08
• 公開（公告）號: CN102154437A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 韓守法;韓家淮;李柱;孟憲軍
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12Q1/34
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及一類具有分子內螺環的羅丹明6G衍生物作為細胞溶酶體熒光染色劑的用途。

背景技術

溶酶體(lysosome)是真核細胞中的一種細胞器，其內部環境呈弱酸性(pH?4～6)，含有多種水解酶。溶酶體不但具有細胞內的消化功能，還與細胞自吞噬、凋亡、免疫防御、癌癥的發展有直接的關聯(1、Luis?Avila?J.[Structure?and?function?oflysosomes].Acta?Cient?Venez.1974；25：130-131；2、Luzio?JP，Pryor?PR，Bright?NA.Lysosomes：fusion?and?function.Nat?Rev?Mol?Cell?Biol.2007；8：622-632；3、Kroemer?G，Jaattela?M.Lysosomes?and?autophagy?in?cell?death?control.Nat?Rev?Cancer.2005；5：886-897)，因此開發和應用能夠標記并追蹤活細胞中溶酶體的分子探針對于研究溶酶體的生物功能，以及活體癌細胞的診斷都有重要的意義(4、Groth-Pedersen?L，Ostenfeld?MS，Hoyer-Hansen?M，Nylandsted?J，Jaattela?M.Vincristine?induces?dramatic?lysosomal?changes?and?sensitizes?cancer?cells?to?lysosome-destabilizing?siramesine.Cancer?Res.2007；67：2217-2225；5、Urano?Y，Asanuma?D，HamaY，et?al.Selective?molecular?imaging?of?viable?cancer?cells?with?pH-activatable?fluorescence?probes.Nat?Med.2009；15：104-109)。

現在已有多種可以標記溶酶體的分子探針，用于研究溶酶體的生物功能。這些探針大多含有弱堿性的取代基團，可以選擇性聚集在低pH值的溶酶體內，如最常用Invitrogen開發的向酸性熒光探針(lysotracker?green?DND-26等)。該類探針的常見缺點包括(1)背景信號比較高，導致非特異性標記；(2)穩定性低，容易被光淬滅，喪失熒光性能；(3)在細胞內的保留期短，隨時間的延長，細胞內探針容易流失。

根據文獻報道用羅丹明6G和含氨基的化合物乙二胺，丙二胺和N，N-二甲基乙二胺制備了一類具有分子內螺環的羅丹明6G衍生物(6、Wu?J，Hwang?I，Kim?KS，Kim?JS.Rhodamine-based?Hg2+-selective?chemodosimeter?in?aqueous?solution：fluorescent?OFF-ON.Organic?Lett，2007，9(5)：907-910)。該類衍生物在進入細胞溶酶體后，溶酶體內的弱酸性環境激發該類衍生物發生異構化，使之成為可以發熒光的分子，并且其熒光強度隨溶酶體內pH值的改變而發生變化，即具有酸敏感性，并且該類衍生物具有低背景、高穩定性和在細胞內保留期長的優點。

發明內容

本發明的目的在于提供一類羅丹明6G衍生物的應用。

所述一類羅丹明6G衍生物的化學結構式如下：

R＝-NH₂，-N(CH₃)₂，-CH₂-N(CH₃)₂

所述一類羅丹明6G衍生物是一類具有分子內5員環羅丹明6G衍生物，所述一類羅丹明6G衍生物可作為細胞溶酶體熒光染色劑用于高選擇性、長期穩定標記細胞溶酶體。

所述一類羅丹明6G衍生物的結構特征在于衍生物具有分子內5員環。

合成含有羅丹明6G衍生物的原料之一為羅丹明6G，合成羅丹明6G衍生物的原料之二為含有氨基化合物，所述氨基化合物的結構特征在于分子的一端含有一個一級氨基；合成羅丹明6G衍生物的原料之二的含有一級氨基的化合物的另一端可以含有其它取代基，如一級氨基，二級氨基，三級氨基等；合成含有羅丹明衍生物的原料之二是含有一級氨的化合物；該類化合物的結構特征在于一級氨取代基與分子另一端的取代基之間間隔至少2個亞甲基。