[發明專利]一種硫酸軟骨素的制備方法無效
| 申請號: | 201110087026.0 | 申請日: | 2011-04-08 |
| 公開(公告)號: | CN102199229A | 公開(公告)日: | 2011-09-28 |
| 發明(設計)人: | 劉榜惠 | 申請(專利權)人: | 淮安麥德森制藥有限公司 |
| 主分類號: | C08B37/08 | 分類號: | C08B37/08;C12S3/02 |
| 代理公司: | 淮安市科翔專利商標事務所 32110 | 代理人: | 韓曉斌 |
| 地址: | 223001 江蘇省淮安*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 硫酸 軟骨素 制備 方法 | ||
技術領域
本發明屬于生物技術領域,具體涉及一種硫酸軟骨素的制備方法。
背景技術
硫酸軟骨素,英文名chondroitin?sulfate,是以動物(豬、牛、馬、羊、雞、鯊魚等)的軟骨為原料的一種高分子酸性粘多糖,其分子結構為β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖通過β1→3糖苷鍵形成的重復二糖單位所組成的多糖鏈。它是一種白色或微黃色粉末,吸水性強,易溶于水而成粘稠液體,不溶于酒精、丙酮、乙醚和氯仿等有機溶劑,其鹽類對熱較穩定。
目前,硫酸軟骨素通常采用堿-酶解提取法,主要包括以下步驟:
1)??????堿提酶解:原料(軟骨)加水浸沒,用氫氧化鈉調pH8.5,升溫至55-60℃,保溫4-6小時,再加入2%的堿性蛋白酶,保持pH8.5,保溫55-60℃攪拌6-8小時,升溫至沸騰15分鐘左右,過濾,得濾液;
2)??????酒精沉淀:濾液中加入3%重量的氯化鈉,降溫至室溫,按體積的2.5倍加入95%酒精,靜止8小時,取沉淀;
3)??????氧化:按沉淀與水的重量比為1:10的比例混合水,同時加入3%重量的氯化鈉,調pH10-12,加入2%重量雙氧水氧化8小時,過濾,取濾液;
4)??酒精沉淀干燥:濾液調pH6,加入體積的2.5倍量酒精二次沉淀,沉淀再用95%酒精脫水兩次,干燥粉碎得到硫酸軟骨素成品。
由于軟骨原料表面附著許多脂肪或肌肉組織,這些組織是硫酸軟骨素生產過程中的主要雜質,而且硫酸軟骨素溶液比較粘稠,溶液中雜質過多,過濾非常困難,使規模產生硫酸軟骨素時,過濾效率非常低下,許多廠家使用原始落后的馬槽進行過濾,致使生產效率不高,混進的雜質影響產品后續的純化;其次由于硫酸軟骨素溶液中雜質過多,使得純化操作變得復雜,雜質過于分散不利于回收利用,造成環境污染。
發明內容
本發明的目的在于:提供一種硫酸軟骨素的制備方法,該制備方法使硫酸軟骨素生產過程簡單,原料中的雜質能有效處理并回收利用,產品質量好。
本發明的技術解決方案是該制備方法包括下列步驟:
(1)水煮:軟骨原料加水浸沒,升溫至80-100℃,煮12-24小時,使附在軟骨表面的肌肉組織剝離,撈出軟骨;
(2)氣蒸:將步驟(1)得到的軟骨放入蒸籠,100-150℃的蒸汽蒸16小時以上,蒸籠上端設蒸汽出口,排出蒸汽冷凝后進行油水分離,水回到蒸籠,油收集;
(3)酶解:將步驟(2)處理的軟骨加水浸沒,按體積加3%的氯化鈉,用堿調pH至8-9,升溫至55-60℃,再按軟骨原料重量1-3%加入2709堿性蛋白酶,保持pH8-9,保溫55-60℃攪拌4-6小時,升溫至沸騰12-18分鐘;
(4)氧化:將步驟(3)得到的溶液,降溫至35-40℃,調pH至10-12,加入溶液體積的1-3%雙氧水氧化6小時以上,過濾得濾液;
(5)酒精沉淀:將步驟(4)得到的濾液,調pH6-7,加入酒精使溶液酒精濃度達到60%,沉淀16小時以上;
(6)脫水烘干:沉淀結束后棄去上層酒精,收集沉淀,脫水干燥,得硫酸軟骨素成品。
本發明取得的效果是:
一、本發明經過水煮得到的軟骨只剩下潔白軟骨組織和表面少量油脂,其它動物組織都已剝離,水煮、剝離下來的其它組織可以回收利用,水可以重復使用;
二、???軟骨再經過氣蒸,可以將軟骨中絕大部分的油脂高溫蒸出,蒸汽冷凝后進行油水分離,回收利用;
三、???生產過濾操作簡單,酶解液中無油脂及濾渣少,過濾效率高;
四、???產品質量穩定,硫酸軟骨素的含量達到90%以上。
具體實施方式
下面結合具體實施例進一步說明本發明的技術解決方案,這些實施例不能理解為是對技術解決方案的限制。
實施例1:依以下步驟制備硫酸軟骨素
(1)水煮:100公斤軟骨原料加水浸沒,升溫至80℃,煮24小時,使附在軟骨表面的肌肉組織剝離,撈出軟骨;
(2)氣蒸:將步驟(1)得到的軟骨放入蒸籠,100℃的蒸汽蒸16小時以上,蒸籠上端設蒸汽出口,排出蒸汽冷凝后進行油水分離,水回到蒸籠,油收集;
(3)酶解:將步驟(2)處理的軟骨加水浸沒,按體積加3%的氯化鈉,用堿調pH至8,升溫至55℃,再加入1Kg2709堿性蛋白酶,保持pH8,保溫55℃攪拌6小時,升溫至沸騰12分鐘;
(4)氧化:將步驟(3)得到的溶液,降溫至35℃,調pH至10,加入溶液體積的1%雙氧水氧化6小時以上,過濾得濾液;
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