[發(fā)明專利]一種融合蛋白TAT-NANOG及其編碼基因與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110084055.1
• 申請(qǐng)日: 2011-04-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102212141A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-10-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴建武;曹佳妮;陳冰;肖志峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N5/074;C12N5/071;C12R1/91;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.一種蛋白，包括TAT跨膜肽以及結(jié)合在所述TAT跨膜肽的氨基端或羧基端的細(xì)胞重編程相關(guān)因子；

所述細(xì)胞重編程相關(guān)因子為NANOG轉(zhuǎn)錄因子、c-myc因子、klf4因子或SOX2因子；所述NANOG轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列如序列表中序列6所示。

2.如權(quán)利要求1所述的蛋白，其特征在于：所述TAT跨膜肽是如下1)或2)所述的多肽：

1)序列表中序列2所示的氨基酸殘基組成的多肽；

2)序列表中序列2所示的氨基酸殘基序列的N末端和/或C末端加上1-10個(gè)任意氨基酸殘基且具有跨膜功能的由1)衍生的多肽；

所述TAT跨膜肽2)優(yōu)選是如下a)或b)或c)：

a)在序列表中序列2所示的氨基酸殘基序列的C末端加上序列表中序列4所示的HA標(biāo)簽；

b)在序列表中序列2所示的氨基酸殘基序列的N末端加上His標(biāo)簽；

c)在序列表中序列2所示的氨基酸殘基序列的C末端加上序列表中序列4所示的HA標(biāo)簽并在序列表中序列2所示的氨基酸殘基序列的N末端加上His標(biāo)簽。

3.如權(quán)利要求1或2所述的蛋白，其特征在于：所述蛋白是如下I)或II)的蛋白質(zhì)：

I)其氨基酸序列如序列表中序列8的第22-348位所示；

II)其氨基酸序列如序列表中序列8所示。

4.權(quán)利要求1-3中任一所述的蛋白的編碼基因。

5.如權(quán)利要求4所述的基因，其特征在于：所述基因是如下1)或2)：

1)其核苷酸序列如序列表中序列7的第64-1047位；

2)其核苷酸序列如序列表中序列7所示。

6.含有權(quán)利要求4或5所述基因的重組表達(dá)載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。

7.如權(quán)利要求6所述的重組表達(dá)載體，其特征在于：所述重組表達(dá)載體是將權(quán)利要求4或5所述的基因插入載體pET-28a的多克隆位點(diǎn)得到的載體。

8.權(quán)利要求1-3中任一所述的蛋白或權(quán)利要求4或5所述的基因在制備如下(1)-(4)中任一所述產(chǎn)品中的應(yīng)用：

(1)促進(jìn)細(xì)胞向誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞轉(zhuǎn)變的產(chǎn)品；

(2)促進(jìn)細(xì)胞增殖的產(chǎn)品；

(3)促進(jìn)細(xì)胞中內(nèi)源NANOG轉(zhuǎn)錄因子或OCT4轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)量增強(qiáng)的產(chǎn)品；

(4)促進(jìn)細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白表達(dá)量增強(qiáng)的產(chǎn)品。

9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述OCT4轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列如序列表中序列10所示，所述OCT4轉(zhuǎn)錄因子的編碼基因如序列表中序列9所示；所述細(xì)胞周期蛋白是CDC25A或CDK6。

10.如權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于：所述細(xì)胞均是成纖維細(xì)胞，優(yōu)選是HAF細(xì)胞。