[發明專利]Exendin-4偶聯超順磁性氧化鐵納米顆粒制法及用途

無效

• 申請號: 201110083936.1
• 申請日: 2011-04-02
• 公開（公告）號: CN102249345A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: 吳育連;張波;翟傳鑫
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C01G49/06
• 分類號: C01G49/06;G01N24/08;B82Y30/00;B82Y40/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.?Exendin-4偶聯的超順磁性氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征是依次進行以下步驟：?

1）、在惰性氣體的保護下，于室溫中將FeCl₃?6H₂O和FeCl₂?4H₂O溶解于聚乙二醇600中，得到黃褐色溶液；所述FeCl₃?6H₂O與FeCl₂?4H₂O的摩爾比為2:1，?FeCl₃?6H₂O在黃褐色溶液中的濃度為0.01～0.1M；

2）、在惰性氣體的保護下，將步驟1）所得的黃褐色溶液升溫至120～140℃，然后加入去離子水和2,2'-(乙烯二氧)雙(乙胺)，在120～140℃保溫30～60分鐘，得黑色懸浮液；所述去離子水與FeCl₃?6H₂O的摩爾比為30～10：1，2,2'-(乙烯二氧)雙(乙胺)與FeCl₃?6H₂O的摩爾比為200～400：1；?

3）、將步驟2）所得的黑色懸浮液冷卻至室溫，加入甲苯離心，去除上清液，得到棕色的氧化鐵納米顆粒；所述甲苯與黑色懸浮液的體積比為1～3：1；

4）、在惰性氣體保護下，將步驟3）所得的氧化鐵納米顆粒分散于甲苯中，使氧化鐵納米顆粒的濃度為0.005～0.05M；然后在攪拌的情況下，加入3-(三甲氧基甲硅烷基)-1-丙胺和鈦酸丁酯，加熱至70～90℃，回流反應10～16小時；3-(三甲氧基甲硅烷基)-1-丙胺與氧化鐵納米顆粒的摩爾比為5～30：1，鈦酸丁酯與氧化鐵納米顆粒的摩爾比為1～5：1；

5）、將步驟4）反應結束所得的溶液冷卻至室溫并離心分離，用甲苯清洗，得到APS-SPIO；

將所述APS-SPIO分散于甲苯中，使APS-SPIO的濃度為0.005～0.05M；然后于室溫中在超聲及機械攪拌下，加入雙羧基PEG和二環己基碳二亞胺，反應3～5小時后，所述雙羧基PEG與APS-SPIO的摩爾比為1～5：1，二環己基碳二亞胺與APS-SPIO的摩爾比為5～20：1；

上述反應結束后，再加入2,2'-(乙烯二氧)雙(乙胺)，于室溫中在超聲及機械攪拌的條件下繼續反應3～5小時；所述2,2'-(乙烯二氧)雙(乙胺)與APS-SPIO的摩爾比為1～5：1；

6）、將步驟5）所得的產物離心，用乙醇和去離子水清洗，得到PEG-SPIO，并分散于磷酸鹽緩沖溶液中，得到PEG-SPIO的PBS溶液；所述PEG-SPIO的PBS溶液中Fe元素濃度為3~7毫克/毫升；

7）、將摩爾比1:?2.5的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽與N-羥基琥珀酰亞胺混合，得混合物；

取步驟6）所得的部分的PEG-SPIO的PBS溶液加入exendin-4水溶液和上述混合物，于常溫下攪拌反應?8~12小時，從而使exendin-4通過表面的羧基與?PEG-SPIO表面的氨基通過縮水反應連結到PEG-SPIO表面；再通過超濾，最終得到的SPIO-exendin4；所述exendin-4與Fe元素的質量比為0.5～1.5：1，PEG-SPIO與EDC的摩爾比為1：2～4。

2.?根據權利要求1所述的Exendin-4偶聯的超順磁性氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征是：所述步驟2）在攪拌條件下進行。

3.?根據權利要求1或2所述的Exendin-4偶聯的超順磁性氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征是：所述惰性氣體為Ar。

4.?如權利要求1～3中任意一種方法制備的Exendin-4偶聯的超順磁性氧化鐵納米顆粒的用途，其特征是：用于胰島beta細胞的標記及胰島素瘤的靶向顯像。