[發明專利]一種溫度適性廣的中性脂肪酶LIPG及其基因和應用無效

申請號：	201110081828.0	申請日：	2011-04-01
公開（公告）號：	CN102732490A	公開（公告）日：	2012-10-17
發明（設計）人：	詹志春;張菁	申請（專利權）人：	武漢新華揚生物股份有限公司
主分類號：	C12N9/20	分類號：	C12N9/20;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;A23K1/165;C12R1/19;C12R1/07;C12R1/225
代理公司：	北京法思騰知識產權代理有限公司 11318	代理人：	高宇;楊小蓉
地址：	430074 湖北省武***	國省代碼：	湖北;42
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種溫度適性廣中性脂肪酶 lipg 及其基因應用
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及基因工程領域，具體地，本發明涉及一種溫度適性廣的中性脂肪酶LIPG及其基因和應用。

背景技術

脂肪在畜禽體內的作用主要是氧化供能，它含有的能量是碳水化合物的2.25倍，可滿足動物體對較高能量濃度的要求。脂肪是脂溶性維生素和某些激素的溶劑，促進對這些物質的吸收和利用，同時為畜禽提供必需的不飽和脂肪酸，保證畜禽的健康生長；添加脂肪還可減少飼料加工過程中的粉塵，改善飼料外觀，在高溫條件下，還有利于提高能量攝入量，降低畜禽的體熱增耗，減緩熱應激；此外，添加脂肪可有效地提高飼料的適口性。因此，在豬、雞和奶牛飼料中添加脂肪是比較普遍的作法。

脂肪酶(lipase)，也稱為三脂酰甘油水解酶(triacylglycerol?hydrolase，EC?3.11.3)，能夠分解生物產生的各種天然的油和脂肪，自然界中廣泛存在。脂肪酶是脂肪代謝最基本的酶，若缺乏將會危及機體健康。單胃動物自身能夠分泌內源性消化酶，包括淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。但幼禽、幼畜消化機能尚未發育健全，內源性消化酶分泌量不足。在現代養豬生產中，早期斷奶甚至超早期斷奶在養豬生產中普遍實施，但早期斷奶后，幼畜消化酶分泌產生不良影響，消化酶分泌急劇減少，斷奶2周后才逐漸恢復并增加。斷奶后2周內消化酶分泌不足是斷奶仔豬生長阻滯的主要因素之一；雛雞大多數消化酶在2周齡左右才發育到高峰，因此，消化酶分泌不足也是雛雞對飼料利用的主要限制因素之一。在幼禽、幼畜日糧中添加外源性淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等，能補充體內內源酶的不足，并能減輕斷奶仔豬的斷奶應激，提高動物的生產性能。有研究表明，外源性脂肪酶可提高飼料中的脂肪消化率，可提飼料的表觀代謝能值和飼料轉化率。

脂肪酶應用在不同領域中的選擇性是基于它的底物特異性、位置特異性、定向性、溫度和pH特性等。和大部分飼養酶制劑一樣，應用在飼料行業的脂肪酶需要具備一些特殊的性質。真正適合在飼料中使用的脂肪酶，必須具有好的熱穩定性而同時在常溫下具有高活性；最適pH在酸性同時在整個酸性和中性的pH范圍內又能維持較高的活性；對動物胃、胰蛋白酶和別的蛋白酶都具有較好的抗性等綜合性質。對于淡水養殖的主要魚類-鯉科魚類來說，因為它們沒有胃，只有pH值呈中性(pH6.5～8.0)的腸道，因而與其他畜禽飼料添加的脂肪酶相比，在魚類飼料中添加的脂肪酶必需使用在中性pH值條件下。另外由于水產養殖環境得水體溫度一般在0-30℃之間，投放到養殖池塘的脂肪酶需要在低溫具有較高的活性。而到目前為至，幾乎沒有在低溫及中性的環境下具有高酶活性脂肪酶的報道。因此，開發溫度適應性廣的中性脂肪酶具有較好的科學理論價值，也具有較大的應用潛力和產業價值。

發明內容

本發明的目的是提供一種能高效應用于淡水魚類的溫度適性廣的高溫中性脂肪酶。

本發明的再一目的是提供編碼上述溫度適性廣的中性脂肪酶的基因。

本發明的另一目的是提供包含上述基因的重組載體。

本發明的另一目的是提供包含上述基因的重組菌株。

本發明的另一目的是提供一種制備上述溫度適性廣的中性脂肪酶的基因工程方法。

本發明的另一目的提供上述溫度適性廣的高溫中性脂肪酶的應用。

本發明提供了一種溫度適性廣的高溫中性脂肪酶LIPG，其氨基酸序列如SEQ?IDNO.1所示。

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