[發(fā)明專利]一株具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110074212.0
• 申請(qǐng)日: 2011-03-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102409005A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-04-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 牛彥波;吳皓瓊;殷博;曹亞彬;郭立姝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黑龍江省科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C05F17/00;C12R1/10
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 金永煥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株高溫菌。?

背景技術(shù)

目前，高溫好氧堆肥化處理是解決農(nóng)村固體廢物問(wèn)題的一個(gè)重要途徑，具有保護(hù)環(huán)境，節(jié)約原材料和能源、投資少、運(yùn)行費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。但是，農(nóng)業(yè)固體廢物，尤其是牛等食草動(dòng)物的糞便中含有大量的木質(zhì)纖維素，其成分復(fù)雜，難以被充分利用或被大多數(shù)微生物直接作為碳源物質(zhì)而轉(zhuǎn)化利用。因此，它們的生物降解成為生物技術(shù)處理有機(jī)固體廢物的關(guān)鍵，也是近年來(lái)研究的重點(diǎn)。然而，在堆肥過(guò)程中木質(zhì)素、纖維素和半纖維素等分子產(chǎn)生破壞，斷裂和分解的主要階段是在堆肥高溫階段，由于溫度的影響，微生物種群受到很大的抑制，表現(xiàn)為種類單一，數(shù)量減少，比中溫階段要少1-2個(gè)數(shù)量級(jí)，這無(wú)疑限制了大分子難降解的木質(zhì)纖維素物質(zhì)的快速降解。已有的研究表明，在堆肥高溫階段，堆肥中絕大部分的寄生蟲(chóng)、蟲(chóng)卵、孢子和病原菌等被殺死，是保證堆肥無(wú)害化的最重要階段。大量的研究表明，堆體溫度應(yīng)控制在45℃-65℃之間，尤其是在55℃-60℃時(shí)比較好，此時(shí)也是木質(zhì)纖維素等大分子物質(zhì)降解的最適溫度。研究該溫度范圍內(nèi)的微生物及其活動(dòng)特性對(duì)堆肥技術(shù)的提高具有重要意義。從已有的文獻(xiàn)中可以看出，現(xiàn)今關(guān)于牛糞堆肥的而研究是非常活躍的，相關(guān)的文獻(xiàn)也較多，但關(guān)于分離于牛糞堆肥的同時(shí)具有纖維素酶活與蛋白酶活的高溫地衣芽孢桿菌的研究還極少，目前關(guān)于地衣芽孢桿菌的研究主要集中于其淀粉酶活與產(chǎn)抗生素的研究方面。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一株具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌。?

具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，它為地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)NF705，屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)，已在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏地址是北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏編號(hào)為CGMCCNo：4489，保藏日期為2010年12月17日；它為桿菌，長(zhǎng)為1.5μm～3.5μm，寬為0.6μm～0.8μm，無(wú)莢膜，中生橢圓狀芽孢，孢囊稍膨大。?

本發(fā)明中具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，它為地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)NF705，它的培養(yǎng)特征如下：?

瓊脂斜面：生長(zhǎng)旺盛，粗糙，不透明，粘著，擴(kuò)展，有毛狀枝條。?

葡萄糖瓊脂斜面：生長(zhǎng)豐厚，有皺紋，表面有似擠出的小滴或粘液狀囊，沿接種線有毛狀枝條。?

酪氨酸瓊脂斜面：生長(zhǎng)旺盛，粗糙，不透明，粘著，擴(kuò)展，有毛狀枝條。?

肉汁瓊脂平板：菌落大，擴(kuò)展，表面粗糙或具皺紋，有毛狀枝條，暗白色，培養(yǎng)物顏色加深，呈微黃褐色。?

本發(fā)明中具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，它為地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)NF705，其明膠穿刺快速的呈漏斗狀、淀粉水解呈陽(yáng)性、乙酰甲基甲醇反應(yīng)呈陽(yáng)性、利用檸檬酸鹽、硝酸鹽還原呈陽(yáng)性、卵磷脂酶試驗(yàn)呈陰性、利用阿拉伯糖、利用木糖、利用葡萄糖、利用蔗糖、利用甘露醇產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣、固體培養(yǎng)基上最適生長(zhǎng)溫度為45～55℃，液體培養(yǎng)基上最適生長(zhǎng)溫度為58～62℃，最適生長(zhǎng)pH值為4.5～8.5。?

本發(fā)明中具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，它為地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)NF705，其16S?rRNA序列分析結(jié)果顯示與Bacillus?licheniformis的16S?rRNA序列的相似性最高，達(dá)到99％；并結(jié)合細(xì)菌形態(tài)特征、生長(zhǎng)條件、生理生化鑒定結(jié)果，確定地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)NF705為芽孢桿菌屬的一個(gè)新菌種。?

本發(fā)明中具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，它為地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)NF705，屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)，已在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏地址是北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏編號(hào)為CGMCC?No：4489，保藏日期為2010年12月17日。?

本發(fā)明以自然堆積的牛糞為分離源，采用高溫培養(yǎng)馴化的手段分離篩選出一株具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，它具有較高纖維素酶活與蛋白酶活，羧甲基纖維素相對(duì)酶活性，1.56±0.11cm.d^-1，蛋白酶相對(duì)活性1.28±0.2cm.d^-1。?

本發(fā)明具有雙重酶活用于好氧堆肥發(fā)酵的高溫菌，對(duì)堆肥技術(shù)的提高具有重要意義。?

附圖說(shuō)明