[發(fā)明專利]一種聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶Ⅰ其制備方法及應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110067552.0
• 申請日: 2011-03-21
• 公開（公告）號: CN102690804A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發(fā)明（設計）人: 楊仲璠;徐川;梁果義;王俊玲;連治國;王喜鶴;吳彥卓;徐明波
• 申請（專利權(quán)）人: 北京雙鷺藥業(yè)股份有限公司;北京雙鷺立生醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C12N11/08
• 分類號: C12N11/08;A61K38/50;A61K47/48;A61P35/00
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• 代理人: 暫無信息

1.一種聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶I，其主要特征在于每個重組人精氨酸酶I分子與單一聚乙二醇分子偶聯(lián)，并且連接位點是精氨酸酶I分子的N末端α氨基。

2.如權(quán)利要求1所述的聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶I，其又一個特征是：所述聚乙二醇其一端用單甲氧基封閉，另一端帶有一個具有反應活性的醛基且分子量為10KD-40KD。

3.如權(quán)利要求1所述的聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶I，其又一個特征是：所述重組人精氨酸酶I是通過基因重組技術(shù)制備的人精氨酸酶I或者具有相同活性的突變體。

4.一種制備如權(quán)利要求1所述聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶I的方法，其主要步驟是：

(1)烷基化反應：

在室溫、pH4-6、有還原劑存在的條件下，將重組人精氨酸酶I與活化的聚乙二醇醛混合，重組人精氨酸酶I與聚乙二醇的投料比(摩爾比)為1∶1-1∶10，聚乙二醇的分子量為10KD-40KD，反應10-15小時，加甘氨酸終止反應

(2)反應混合物的分離與純化：

經(jīng)凝膠排阻層析去除未修飾的重組人精氨酸酶I分子與未反應的聚乙二醇分子，再經(jīng)離子交換層析去除多修飾組分后即可獲得聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶I目標產(chǎn)物。

5.一種藥物組合物，其特征在于該組合物以權(quán)利要求1所述的分子為主要活性物質(zhì)。

6.權(quán)利要求1所述的聚乙二醇修飾的重組人精氨酸酶I和權(quán)利要求5所述的藥物組合物在制備用于治療人類肝癌或黑色素瘤的藥物中的應用。