[發明專利]一種調控動物內源基因表達的遺傳修飾方法

有效

• 申請號: 201110066975.0
• 申請日: 2011-03-18
• 公開（公告）號: CN102669057A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 費儉;孫瑞林;毛積芳;王鑄鋼
• 申請（專利權）人: 上海南方模式生物科技發展有限公司;上海南方模式生物研究中心
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/68
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君

1.一種制備模式動物的方法，所述模式動物中目的內源基因是可誘導調控表達的，所述方法包括：

(1)建立轉基因動物1：該動物1基因組中，目的內源基因的轉錄起始位點附近插入了四環素響應元件；

(2)建立轉基因動物2：該動物2基因組中，包括轉錄抑制因子或轉錄激活因子的編碼基因，所述的轉錄抑制因子或轉錄激活因子可與四環素響應元件結合，且所述結合受四環素或其類似物調控；

(3)將轉基因動物1和轉基因動物2進行交配，選出基因組中既包括四環素響應元件、又包括轉錄抑制因子或轉錄激活因子的編碼基因的動物，作為模式動物。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的四環素響應元件插入在所述的目的內源基因的轉錄起始位點上游或下游4000bp范圍內。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，

所述的轉錄抑制因子選自：tTR-KRAB或RtTR-KRAB；

所述的轉錄激活因子選自：tTA或rtTA。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)、(2)或(3)中，還分別包括，對獲得的動物進行交配建系，獲得子代動物。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的四環素的類似物是：強力霉素。

6.一種誘導調控模式動物中目的內源基因表達的方法，所述方法包括：

(a)提供模式動物，所述模式動物通過權利要求1所述的方法獲得；

(b)給予(a)的模式動物四環素或其類似物，從而調控模式動物中目的內源基因的表達。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，

(a)所述的模式動物中，包括轉錄抑制因子RtTR-KRAB的編碼基因；(b)中，給予(a)的模式動物四環素或其類似物，模式動物中目的內源基因的表達受到抑制；不給予(a)的模式動物四環素或其類似物，目的內源基因正常表達；或者

(a)所述的模式動物中，包括轉錄抑制因子tTR-KRAB的編碼基因；(b)中，不給予(a)的模式動物四環素或其類似物，模式動物中目的內源基因的表達受到抑制；給予(a)的模式動物四環素或其類似物，目的內源基因的表達抑制被解除；或者

(a)所述的模式動物中，包括轉錄激活因子tTA的編碼基因；(b)中，給予(a)的模式動物四環素或其類似物，模式動物中目的內源基因的正常表達；不給予(a)的模式動物四環素或其類似物，目的內源基因超表達；或者

(a)所述的模式動物中，包括轉錄激活因子rtTA的編碼基因；(b)中，給予(a)的模式動物四環素或其類似物，激活模式動物中目的內源基因的超表達；不給予(a)的模式動物四環素或其類似物，目的內源基因正常表達。

8.一種模式動物在基因功能研究中的用途，所述的模式動物通過權利要求1所述的方法獲得。

9.一種細胞，其來源于一種模式動物，所述的模式動物通過權利要求1所述的方法獲得。

10.權利要求9所述的體細胞在基因功能研究中的用途。