[發明專利]提純紅霉素A的改進方法

無效

• 申請號: 201110065664.2
• 申請日: 2011-03-18
• 公開（公告）號: CN102180922A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發明（設計）人: 朱家文;朱晟;陳葵;武斌;紀利俊;吳艷陽
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 上海順華專利代理有限責任公司 31203
• 代理人: 陳淑章

技術領域

本發明涉及一種紅霉素A的提純方法，具體地說，涉及一種采用大孔樹脂吸附法從發酵液中提純紅霉素A的方法。

背景技術

紅霉素(Erythromycin，簡稱EM)是從紅霉素鏈霉菌發酵而得的一種大環內酯類廣譜抗生素，是目前主要的抗生素產品之一。紅霉素中存在紅霉素A、B和C等多種不同的異構體，其化學性質與結構都很相似，但是其中紅霉素A的抗菌活性較強，毒性較低，為醫用紅霉素的主要抗菌活性成分。

在紅霉素A的提取精制方面，樹脂吸附法與傳統的溶劑萃取法相比，具有溶媒損耗小、操作簡便、環境污染少等優點，日益受到重視。

現有涉及采用樹脂吸附法從發酵液中提純紅霉素A的方法的文獻有：中國抗生素雜志2007，32(5).284-286，315和專利文獻CN?101367855，由其所揭示的技術方案可知，現有技術主要存在的缺陷是：(1)第1BV紅霉素洗脫率較低，(2)未涉及發酵液中色素和蛋白等雜質的去除方法(如此會影響最終產品的質量)，(3)對吸附柱的再生，未考慮發酵液中雜質的脫除效果，再生效果不佳。

鑒于此，本發明提供一種采用樹脂吸附法從發酵液中提純紅霉素A的方法，克服現有技術中存在的缺陷。

發明內容

本發明所述的從發酵液中提純紅霉素A的方法，包括如下步驟：

(1)樹脂吸附

以紅霉素發酵液為原料，經膜過濾后所得濾液調整其pH值至9.0～10.0后進行固定床非極性大孔吸附樹脂吸附，控制紅霉素吸附量為非極性大孔吸附樹脂飽和吸附量的60％～70％(在吸附過程中若濾液pH有所下降，則即時進行調整，使其始終不低于9.0)；

(2)樹脂洗滌

用pH值為8.0～11.0的含0.05mol/L(B₄O₇)^2-的硼砂-NaOH緩沖溶液或其與能夠與水互溶或者部分互溶的有機溶劑【如(但不僅限于)醇類、酮類、醚類或酯類等，優選為丙酮】組成的混合溶液(在所述的混合溶液中，有機溶劑含量優選為1v/v％～5v/v％)作為洗滌劑，在40℃條件下，對步驟(1)中非極性大孔吸附樹脂進行洗滌，當固定床層出口處瞬時流出液的pH值與洗滌劑的pH值相同時，停止洗滌；

(3)樹脂洗脫

對經步驟(2)洗滌的非極性大孔吸附樹脂，先用1BV(BV為固定床層體積)去離子水過柱(頂洗掉床層內的洗滌劑)，然后用乙酸丁酯作為洗脫劑進行洗脫；

(4)洗脫液成鹽

對由步驟(3)所得的第一個1BV洗脫液中的紅霉素A結晶、干燥后得目標產品；

所述的非極性大孔吸附樹脂，包括：美國Rohm-hass公司產品Amberlite?XAD16或Amberlite?XAD?1600、或日本三菱公司產品SEPABEADS?SP207或SEPABEADS?SP825以及性質類似的國產吸附樹脂等。

上述步驟(2)中選擇硼砂-NaOH緩沖溶液的原因在于：(1)實驗發現紅霉素濾液中的色素類分子易溶于堿性溶液，且其中的蛋白質分子大多呈酸性，故以堿性緩沖溶液洗去吸附樹脂中的色素、蛋白等雜質效果最好；(2)緩沖溶液中較高的、穩定的pH值有利于將吸附在樹脂上的紅霉素A在短時間內進一步轉為呈分子態的游離堿而不產生堿性破壞，增加了后續洗脫過程的洗脫率；(3)相比于其它用有機酸或有機堿配置的緩沖溶液，此緩沖溶液價格便宜，節約生產成本；(4)此緩沖溶液中含有較高的Na⁺離子強度，Na⁺的水和作用可以有效降低紅霉素A在水溶液中的溶解度，減少洗滌過程中紅霉素A的損失；(5)上柱吸附的紅霉素濾液中含有高價離子(如Ca²⁺、Mg²⁺和Fe²⁺等)，不能使用含有碳酸根離子的緩沖溶液。

此外，本發明所述的從發酵液中提純紅霉素A的方法，還包括所用的非極性大孔吸附樹脂的再生步驟，具體包括如下步驟：

對步驟(3)中洗脫完畢的非極性大孔吸附樹脂，先用1BV丙酮過柱，頂洗掉床層內的乙酸丁酯，然后用由濃度為0.1mol/L～1.0mol/L的NaOH水溶液與能夠與水互溶或者部分互溶的有機溶劑【如(但不僅限于)：醇類、酮類、醚類或者酯類等，優選為丙酮】組成的混合溶液(在所述的混合溶液中，有機溶劑含量優選為20v/v％～80v/v％)對所用的非極性大孔吸附樹脂進行再生。

本發明的積極效果是：