[發(fā)明專利]一種千金藤素的分離提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110056911.2
• 申請日: 2011-03-10
• 公開（公告）號: CN102146083A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蔡群虎
• 申請（專利權(quán)）人: 云南漢德生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07D491/056
• 分類號: C07D491/056
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司 53100
• 代理人: 金耀生

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種千金藤素的提取分離方法，具體地說，是一種從植物地不容中提取千金藤素的方法。

背景技術(shù)

千金藤素（Cepharanthine），是一種具有生物活性的雙芐基異喹啉生物堿，主要來源于防已科植物，例如地不容，光葉地不容、金線吊烏龜、江南地不容和臺灣千金藤等。由于地理環(huán)境、氣候條件等因素的影響，不同來源的同一藥材質(zhì)量多存在差異，種屬和源產(chǎn)地的差異導(dǎo)致植物中千金藤素含量高低不一。

千金藤素能促進(jìn)骨髓組織增生，增加血液中白細(xì)胞的數(shù)量，適用于白細(xì)胞減少癥；同時也是較好的抗癌藥增效劑，能提高抗癌藥物的療效，降低抗癌藥的用量，減輕毒副作用；對多種動物炎性水腫和疼痛均有明顯的抑制作用，且無任何毒性反應(yīng)。

現(xiàn)有技術(shù)中千金藤素主要通過純甲醇或乙醇粗提，酸溶堿沉，硅膠柱層析或氧化鋁柱層析，丙酮結(jié)晶，這些傳統(tǒng)方法提取分離所得千金藤素回收率較低，純化過程中千金藤素?fù)p失較大，有機(jī)溶劑消耗量大，工業(yè)化成本較高，工業(yè)污染嚴(yán)重。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種適用于工業(yè)化生產(chǎn)的千金藤素制備方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

取干燥地不容塊根，粉碎，每公斤粉碎物加入2-3L水和0.5-5ml混合生物酶液泡1小時后，加入9-11?L的1-2%（質(zhì)量百分比，下同）HCL水溶液加熱到90℃浸泡3小時；分離藥液，藥渣再次加入9-11?L的1-2%HCL水溶液煎煮3小時，過濾。合并2次濾液，采用陽離子交換柱或者陽離子纖維素柱吸附，富集千金藤素，用添加氫氧化鈉到60-90%（質(zhì)量百分比，下同）乙醇水溶液中至飽和狀態(tài)的溶液作為洗脫液，洗脫，收集千金藤素段洗脫液，調(diào)節(jié)PH值至7，濃縮回收乙醇，過濾，沉淀物用無水乙醇溶解后，用陰離子柱洗脫純化，收集千金藤素段洗脫液，濃縮，結(jié)晶，干燥即得千金藤素。

混合生物酶液由半纖維素酶，果膠裂解酶，中溫液化酶，低溫液化酶，蝸牛酶，黑曲酶等中的一種或幾種組成。

氫氧化鈉飽和的乙醇水溶液的優(yōu)選濃度為80%。

采用上述技術(shù)方案制備千金藤素，采用混合生物酶酸水提取能提高提取效率，提取完全，減少粗提物中有機(jī)雜質(zhì)，用離子交換法替代酸溶堿沉法提高收率，提高千金藤素純度，使用陰離子柱層析替代硅膠和氧化鋁柱層析，降低溶劑成本，對木質(zhì)素去除效果更佳。整個工藝操作簡單、有機(jī)溶劑使用少僅使用少量乙醇和水，工藝路線綠色環(huán)保，生產(chǎn)成本低，利于工業(yè)化生產(chǎn)。

下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，但本發(fā)明要求保護(hù)的內(nèi)容并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1

取干燥地不容塊根1kg，塊根粉碎到40目加2L水和3ml混合生物酶液（果膠裂解酶：α低溫液化酶?=1:4）50℃浸泡1小時后，加入10升1%HCL（質(zhì)量百分比，下同）水溶液加熱到90℃提取3小時。分離藥液，藥渣再次加入10升1%HCL水溶液煎煮3小時，過濾，合并2次濾液，采用強(qiáng)酸苯乙烯磺酸基陽離子交換樹脂001X7交換吸附，富集千金藤素，用添加氫氧化鈉到80%（質(zhì)量百分比，下同）乙醇水溶液中至飽和狀態(tài)的溶液5L作為洗脫液，洗脫，流速為10ml/min，收集千金藤素段洗脫液調(diào)節(jié)PH值至7，濃縮回收乙醇，過濾，沉淀物用無水乙醇溶解后，采用陰離子DESE纖維素柱純化，收集洗脫液，濃縮，用50%乙醇水結(jié)晶干燥得淡黃色粉末9.0克，含量99.6%。

實施例2

取干燥地不容塊根1kg，塊根粉碎到60目加2L水和1ml混合生物酶液（蝸牛酶：黑曲酶?=3:2）50℃浸泡1小時后，加入11升2%HCL（質(zhì)量百分比，下同）水溶液加熱到90℃提取3小時。分離藥液，藥渣再次加入11升2%HCL水溶液煎煮3小時，過濾，合并2次濾液，采用陽離子CM纖維素柱吸附，富集千金藤素，用添加氫氧化鈉到70%乙醇水溶液中至飽和狀態(tài)的溶液5L作為洗脫液，洗脫，流速為10ml/min。收集千金藤素段洗脫液調(diào)節(jié)PH值至7，濃縮回收乙醇，過濾，沉淀物用無水乙醇溶解后，采用700B陰離子樹脂柱純化，收集洗脫液，濃縮，60%乙醇水結(jié)晶干燥得淡黃色粉末8.6克，含量99.2%。

實施例3