[發(fā)明專(zhuān)利]一種冬蟲(chóng)夏草菌分生孢子插片制備及產(chǎn)孢動(dòng)態(tài)計(jì)數(shù)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110055807.1
• 申請(qǐng)日: 2011-03-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102676632A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚一建;任蜀豫
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/06
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/06;C12R1/645
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.一種計(jì)數(shù)冬蟲(chóng)夏草菌所產(chǎn)分生孢子的方法，包括如下步驟：

1)將至少一個(gè)蓋玻片插入接種有冬蟲(chóng)夏草菌液體菌種的固體培養(yǎng)基中，得到插片平板，所有所述蓋玻片的1/6-5/6部分均位于所述固體培養(yǎng)基上方；

2)培養(yǎng)步驟1)得到的插片平板培養(yǎng)至長(zhǎng)出菌落，每隔一段時(shí)間取至少3個(gè)蓋玻片計(jì)數(shù)取平均值，得到冬蟲(chóng)夏草菌在不同時(shí)間產(chǎn)生的分生孢子數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：

步驟1)中，所述至少一個(gè)蓋玻片為6-20個(gè)蓋玻片，所有所述蓋玻片的1/6、1/2或5/6部分均位于所述固體培養(yǎng)基上方；

步驟2)中，所述每隔一段時(shí)間取至少3個(gè)蓋玻片計(jì)數(shù)為每隔1天-5天取3-5個(gè)蓋玻片計(jì)數(shù)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：

步驟1)中，所述至少一個(gè)蓋玻片為6、12或20個(gè)蓋玻片，所述蓋玻片為無(wú)菌蓋玻片；

步驟2)中，所述每隔一段時(shí)間取至少3個(gè)蓋玻片計(jì)數(shù)為每隔1天、3天或5天取3個(gè)蓋玻片計(jì)數(shù)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：

步驟1)中，每1L所述固體培養(yǎng)基按照如下方法制備：(20.0-50.0)克麥麩、(10.0-20.0)克葡萄糖、(2.0-5.0)克蛋白胨、(1.0-3.0)克酵母提取物、200克土豆、(15.0-20.0)克瓊脂和水混合，用水補(bǔ)至1L；

每1L所述固體培養(yǎng)基具體按照如下方法制備：50.0克麥麩、20.0克葡萄糖、5.0克蛋白胨、3.0克酵母提取物、200克土豆、18.0克瓊脂和水混合，用水補(bǔ)至1L；

步驟2)中，所述培養(yǎng)溫度為15℃-20℃，所述培養(yǎng)為靜置暗培養(yǎng)，所述培養(yǎng)時(shí)間為15天-25天。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

步驟2)中，所述培養(yǎng)溫度為15℃、18℃或20℃，所述培養(yǎng)時(shí)間為15天、20天或25天，所述計(jì)數(shù)采用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)。

6.權(quán)利要求1-5中任一所述的方法在繪制冬蟲(chóng)夏草菌產(chǎn)分生孢子的動(dòng)態(tài)曲線中的應(yīng)用。