[發明專利]一株具有抗航天輻射活性的極地生境放線菌

有效

• 申請號: 201110054075.4
• 申請日: 2011-03-08
• 公開（公告）號: CN102676412A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 薛春美;張久明;李勇枝;田黎;高建義;史振平;蓋宇清;郭志峰
• 申請（專利權）人: 中國航天員科研訓練中心;青島科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/06;C12R1/465
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一株具有抗航天輻射活性的極地生境放線菌，涉及該菌株的培養方法、生物學特性及該菌株發酵物對受到⁶⁰Coγ射線輻射的免疫細胞(人淋巴瘤細胞Jurkat細胞)的保護作用。該菌種保藏于中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心，地址為北京朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所，保藏日期2011年2月25日，保藏編號CGMCC?No.4608，分類命名鏈霉菌屬(Streptomyces?sp.)。

背景技術

隨著人類對星際深空的探索，空間輻射問題的研究越來越受到重視。航天員進入太空，受到的空間輻射主要來自銀河宇宙輻射(GCR)、太陽粒子事件(SPE)和地球輻射帶(ERBs)的侵擾，輻射粒子主要是質子和重離子，屬于電離輻射。電離輻射對人體的損傷主要包括對造血系統、免疫系統、及人體遺傳物質DNA的損傷，其中最直接的是對細胞DNA的損傷。免疫系統是輻射損傷的敏感系統，其中淋巴細胞敏感性最高。輻射直接對機體造成的三種危害是，放射性疾病、遺傳性疾病和癌癥。目前有關抗輻射藥尤其是抗航空航天輻射藥的研究報道很少，少數的用中藥、海藻抗輻射活性的研究主要用于抗癌的化療，這種輻射與航天輻射具有較大差別。

極地生境特殊，酷寒和高輻射使生活在此環境微生物通常具有較好的抗輻射活性，可能產生結構新穎的抗輻射物質，而相較于植物、動物資源來說，微生物采集不破壞生態環境，生長周期短，容易人工培養、實現產業化，是最有前途的可持續性利用資源。國內外有關極地微生物藥用的研究多集中在抗菌、抗病毒、抗腫瘤等方面，未見抗輻射研究方面的報道。

發明內容

本發明的目的是提供一株具有抗航天輻射活性的極地生境放線菌，還涉及菌株篩選試驗用免疫細胞人淋巴瘤細胞Jurkat細胞作為抗輻射活性篩選的模型細胞，⁶⁰Coγ射線作為電離輻射源的應用方法。該菌種保藏于中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心，地址為北京朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所，保藏日期2011年2月25日，保藏編號CGMCC?No.4608，分類命名鏈霉菌屬(streptomyces?sp.)。本發明提供了該極地放線菌的來源，生物學特性，培養方法，發酵物的化學處理方法，發酵物對體外免疫細胞的毒性作用，該發酵物對受到輻射的免疫細胞的明顯保護作用。

本發明的目的是由以下技術方案實現的，通過研究獲得了一株具有抗航天輻射活性的極地生境放線菌，其特征在于：菌株屬于鏈霉菌屬(streptomyces?sp.)，其保藏編號：CGMCC?No.4608，該菌株從北極楚科奇海沉積物中分離獲得，該菌株菌落干燥，不透明，表面具灰色粉狀物，與培養基結合緊密，正面灰白色，背面黃褐色，其基內菌絲發育良好，氣生菌絲豐茂，菌絲體細長有分枝，相互交織成網狀，孢子絲呈鏈狀；好氣，革蘭氏染色陽性，不抗酸，不運動，細胞壁I型，以左旋二氨基庚二酸和甘氨酸為特征性組分，該菌能液化明膠，水解淀粉，不產生類黑色素和酪氨酸酶，該菌能利用葡萄糖、蔗糖、D-木糖、D-果糖、L-阿拉伯糖和甘露糖，不能利用L-鼠李糖、棉子糖和肌醇。

所適合的培養基成分為：淀粉20-25g，KNO₃?1-2g，K₂HPO₄?0.5-0.6g，MgSO₄0.5-0.6g，FeSO₄?0.01-0.02g，NaCl?6-7g，MgCl₂·6H₂O?0.46-0.50g，KCl0.06-0.07g，海泥浸提液200-250ml，水800-750ml，pH?7-8；121℃滅菌15-18min，培養條件為：溫度為18-20℃；振蕩速度150r/min，培養15-16天，常規分離獲得菌液和菌絲體兩部分。

所述的菌液部分經甲醇脫鹽后，經乙酸乙酯、正丁醇300ml*3萃取，獲得乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水部分，菌絲體用甲醇100ml*3磁力攪拌1hr*3提取、離心，獲得甲醇提取液部分，其四部分樣品溶液經旋轉蒸發濃縮，獲得四部分樣品浸膏。

所述的四部分樣品浸膏對Jurkat細胞的毒性作用測試該菌株發酵物小于100μg/ml時對Jurkat細胞不具有細胞毒活性。

所述的四部分樣品浸膏對人淋巴瘤細胞Jurkat細胞作為抗輻射活性篩選的模型細胞，Jurkat細胞的濃度為2*10⁵個/ml，⁶⁰Co?γ射線輻射劑量為2.0Gy，劑量率0.667Gy/min。