[發(fā)明專(zhuān)利]一種寬宿主譜雞白痢沙門(mén)氏菌噬菌體及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110053518.8
• 申請(qǐng)日: 2011-03-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102296051A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 包紅朵;王冉;張輝
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N7/00
• 分類(lèi)號(hào): C12N7/00;A61K35/76;A61P31/04
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種寬宿主譜雞白痢沙門(mén)氏菌強(qiáng)裂解性噬菌體及其在養(yǎng)殖環(huán)境中的應(yīng)用，尤其是能夠特異性的殺滅養(yǎng)殖環(huán)境中雞白痢沙門(mén)氏菌的應(yīng)用。屬于微生物工程領(lǐng)域。?

背景技術(shù)

在禽類(lèi)，沙門(mén)氏菌可引起雞白痢、雞傷寒和副傷寒。其中，雞白痢沙門(mén)氏菌引起雞的一種常見(jiàn)多發(fā)性傳染病，嚴(yán)重影響雛雞成活率，成年雞多為慢性或隱性感染，一般不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀。雞白痢沙門(mén)氏菌感染往往是終生帶菌的，感染母雞所產(chǎn)生的蛋，高達(dá)1/3帶菌。帶菌蛋的孵化率低，孵出的雛雞的成活率也低。所以，雞白痢所造成的經(jīng)濟(jì)損失是巨大的。雞白痢呈世界性分布，美國(guó)和歐洲一些國(guó)家基本控制了本病，目前該病主要在發(fā)展中國(guó)家流行，比如中國(guó)等。帶菌雞是本病蔓延與傳播的重要方式。感染雞可通過(guò)互啄、啄食帶菌蛋及皮膚傷口傳播。感染禽的糞便、污染的飼料、飲水及籠具也是雞白痢的來(lái)源。?

控制和解決沙門(mén)氏菌污染一直是全世界的難題。養(yǎng)殖場(chǎng)多利用凈化手段和飼喂抗生素的方法控制沙門(mén)氏菌感染，但由于該病呈垂直和水平兩種方式傳播，這些控制措施并不理想，并且抗生素的大量使用不僅造成耐藥菌株不斷出現(xiàn)，而且抗生素殘留問(wèn)題也愈發(fā)嚴(yán)重。因此，亟待研究開(kāi)發(fā)一種新型的療法和產(chǎn)品，以解決和應(yīng)對(duì)細(xì)菌對(duì)抗生素的耐藥性問(wèn)題，以控制食物細(xì)菌性污染。?

噬菌體是依賴細(xì)菌的病毒，能特異性地感染并裂解宿主菌，正是噬菌體特異性裂解細(xì)菌，而不影響機(jī)體或正常菌群這一特性，使得其有廣闊的應(yīng)用前景。噬菌體在溶解其特異性宿主細(xì)菌時(shí)非常有效，且殺死細(xì)菌的機(jī)制與抗生素不同，不易產(chǎn)生耐藥性和殘留，是一種潛在的新型抗菌劑。噬菌體的裂解譜正在發(fā)生變化，某些噬菌體已不再是單一裂解性的噬菌體，其裂解譜正在擴(kuò)展，比如，Bielke等(2007)分離到的腸炎沙門(mén)氏菌噬菌體成功以1株克雷白氏桿菌(Klebsiella)和3株大腸桿菌分離株為宿主菌擴(kuò)增；徐焰等(2007)分離到的大腸桿菌噬菌體XY對(duì)5株大腸桿菌具有裂解作用。廣譜噬菌體是今后研究的主要方向，克服了噬菌體裂解細(xì)菌具有種和型的特異性的缺點(diǎn)，用這種寬噬噬菌體可以治療細(xì)菌混合感染，具有極好的臨床價(jià)值。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于：提供一種寬宿主譜的雞白痢沙門(mén)氏菌強(qiáng)裂解性噬菌體，它不僅能夠?有效地殺滅養(yǎng)殖環(huán)境中雞白痢沙門(mén)氏菌臨床分離株SPu-116；而且對(duì)雞白痢沙門(mén)氏菌其他臨床分離株(SPu-115、SPu-27、SPu-95、SPu-905)、副傷寒沙門(mén)氏菌ATCC?50073、鼠傷寒沙門(mén)氏菌ATCC?13311、禽沙門(mén)氏菌CVCC?2184、大腸桿菌K88或雞白痢沙門(mén)氏菌CMCC?533也具有裂解活性。?

本發(fā)明的另一目的是：針對(duì)目前禽業(yè)養(yǎng)殖中雞白痢沙門(mén)氏菌引起的疾病并沒(méi)有有效的控制措施，提供一種有效的防治產(chǎn)品。開(kāi)發(fā)對(duì)雞白痢沙門(mén)氏菌具有強(qiáng)裂解作用的噬菌體制劑，該制劑可以單獨(dú)或與其他噬菌體復(fù)配使用，能夠有效殺滅養(yǎng)殖場(chǎng)中雞白痢沙門(mén)氏菌，為目前控制養(yǎng)殖環(huán)境中雞白痢沙門(mén)氏菌提供一種安全、無(wú)毒副作用的噬菌體產(chǎn)品，為工業(yè)化生產(chǎn)噬菌體殺菌劑提供噬菌體來(lái)源。?

本發(fā)明的又一目的是：提供一種有效的防治手段，將所述的噬菌體制備成液體、凍干粉或藥片形式，單獨(dú)使用或與其他噬菌體復(fù)配后，經(jīng)口服、噴霧或注射等方式，用于殺滅畜禽體內(nèi)、畜禽體表、畜禽飼料、養(yǎng)殖器具或養(yǎng)殖空間環(huán)境中的雞白痢。?

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種寬宿主譜雞白痢沙門(mén)氏菌強(qiáng)裂解性噬菌體，其特征在于：保藏號(hào)為：CCTCC?M?2011042，該噬菌體命名為PSPu-4-116，其對(duì)雞白痢沙門(mén)氏菌(SPu-116、SPu-115、SPu-27、SPu-95、SPu-905)、副傷寒沙門(mén)氏菌ATCC?50073、鼠傷寒沙門(mén)氏菌ATCC?13311、禽沙門(mén)氏菌CVCC?2184、大腸桿菌K88或雞白痢沙門(mén)氏菌CMCC?533均具有裂解活性。?

該噬菌體具有呈正多面體的頭部結(jié)構(gòu)和可伸縮性的尾部，頭部直徑約74.3nm，尾部長(zhǎng)約114.2nm；噬菌體在固體培養(yǎng)基上可以形成較大透亮空斑，周?chē)鸁o(wú)暈環(huán)，邊緣清晰規(guī)則，直徑為1.5～2mm；根據(jù)國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)(ICTV)2005年發(fā)表的《病毒分類(lèi)-國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)第八次報(bào)告》為標(biāo)準(zhǔn)，該噬菌體應(yīng)屬于肌尾病毒科。?

一種上述噬菌體的應(yīng)用，其特征在于：純化后的噬菌體能夠用于抑制雞白痢沙門(mén)氏菌。?

在噬菌體的應(yīng)用中，其特征在于：用于抑制雞白痢沙門(mén)氏菌是指：將純化的噬菌體制備成液體、凍干粉或藥片形式，單獨(dú)使用或與其他噬菌體復(fù)配后用于控制養(yǎng)殖環(huán)境中的雞白痢沙門(mén)氏菌。?