[發明專利]一種燕麥β-葡聚糖的制備方法有效
| 申請號: | 201110052851.7 | 申請日: | 2011-03-04 |
| 公開(公告)號: | CN102167753A | 公開(公告)日: | 2011-08-31 |
| 發明(設計)人: | 田晶;徐龍權;翟濱;伏萃翠;鄒麗萍 | 申請(專利權)人: | 大連工業大學 |
| 主分類號: | C08B37/02 | 分類號: | C08B37/02;A61P1/02;A61P1/16;A61P3/06;A61P3/10;A61P9/00;A61P35/00;A61P37/04;A61P39/06 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 燕麥 聚糖 制備 方法 | ||
技術領域
本發明涉及一種從燕麥麩中提取水溶性β-葡聚糖的研究。
背景技術
燕麥β-葡聚糖是由單體β-D-吡喃葡聚糖,通過β-(1-3)和β-(1-4)糖苷鍵連接起來,形成的一種高分子聚合物。通過現代加工工藝,β-葡聚糖大部分集中于碾磨后的副產品麩皮中。燕麥β-葡聚糖能夠抗衰老、調節人體免疫功能、預防和治療由高血脂引起的心腦血管疾病,同時還能控制非胰島素依賴型糖尿病、預防直腸癌、膽結石、齲齒等。
目前,燕麥β-葡聚糖的制備一般通過等電點法去除蛋白質,經硫銨沉淀反復純化制得。但用等電點法去除蛋白去除率低且不穩定,硫銨沉淀純化時間長、工藝繁瑣,不利于工業化生產。
發明內容
本發明的目的是提供一種高效制備燕麥β-葡聚糖的方法。特色之處主要表現為工藝中獨有的低溫浸提步驟和果膠酶處理過程。低溫浸提去除了原料中大部分淀粉使后續工藝能夠更好的進行。果膠酶的使用讓工藝摒棄了傳統的去除蛋白質步驟,巧妙的在去除果膠的同時離心除去蛋白質等雜質。最后工藝中采用二次醇析進一步純化,得到了溶解性好、性質穩定的產品。
本發明的技術方案:以燕麥麩為原料,經低溫浸提、高溫浸提、果膠酶與淀粉酶處理、一次醇析、真空干燥、二次醇析、真空干燥得到燕麥β-葡聚糖。
(1)低溫浸提:燕麥麩按1∶8~1∶12的質量比例加入0.005~0.05mol/L的NaOH溶液,25~30℃恒溫水浴振蕩1~3h。此時淀粉從燕麥麩中溶出。按燕麥麩與水的質量比為1∶10~1∶15加水,過100~200目篩網,4000~5000rpm離心離心15~30min,傾出上清液于燕麥麩中,將淀粉沉淀棄去。此步驟能夠去除原料中的大部分淀粉。
(2)高溫浸提:調混合液pH值為10.0,80℃恒溫水浴振蕩3h,冷卻至室溫,4000rpm離心20min,棄去沉淀。
(3)果膠酶與淀粉酶處理:調提取液pH值為4.5~6.5,加入果膠酶0.01~0.1mg/5g燕麥麩,50~65℃攪拌5~30min,水解提取液中的果膠,同時降低蛋白質的穩定性,使蛋白質易于分離。提取液于100℃滅酶5min,冷卻至室溫,4000~5000rpm離心15~30min,棄去沉淀,其中的沉淀包括蛋白質等雜質。調提取液pH值為5.5~6.5,加入耐高溫α-淀粉酶10~20U/5g燕麥麩,85~95℃攪拌5~30min,冷卻至室溫。在去除提取液中果膠的同時離心除去蛋白質等雜質,比傳統的去除蛋白質的方法更加簡便、有效。
(4)一次醇析:調節提取液pH值為7.0,加入95%乙醇至溶液中乙醇濃度達到70%,靜置過夜。
(5)真空干燥:將一次醇析后的提取液2000rpm離心10min,棄去上清液,用無水乙醇使沉淀脫水,2000rpm離心10min,棄去上清液,利用旋轉蒸發儀干燥。
(6)二次醇析:將干燥后的樣品配成1~5%w/w的溶液,加入95~100%乙醇至溶液中乙醇濃度達到70~90%,靜置過夜,進一步純化產品。
(7)真空干燥:將二次醇析后的溶液2000rpm離心10min,棄去上清液,用無水乙醇使沉淀脫水,2000rpm離心10min,棄去上清液,利用旋轉蒸發儀干燥得到燕麥β-葡聚糖。
本發明摒棄了傳統去除蛋白質的步驟,巧妙的在去除果膠的同時離心除去蛋白質等雜質,并運用低溫浸提步驟去除原料中大部分淀粉,二次醇析后得到的產品純度可達67.1%,得率為4.2%,蛋白質含量1.7%,溶解性好,性質穩定,有利于大規模生產、利用。
具體實施方式
實施例1的具體制備方法如下:
(1)低溫浸提:燕麥麩按1∶10的質量比例加入0.01mol/L的NaOH溶液,30℃恒溫水浴振蕩2h。按燕麥麩與水的質量比為1∶15加水,過180目篩網,4000rpm離心20min,傾出上清液于燕麥麩中。
(2)高溫浸提:調混合液pH值為10.0,80℃恒溫水浴振蕩3h。冷卻至室溫,4000rpm離心20min,棄去沉淀。
(3)果膠酶與淀粉酶處理:調提取液pH值為5.5,加入果膠酶0.06mg/5g燕麥麩,60℃攪拌5min,再于100℃滅酶5min,冷卻至室溫,4000rpm離心20min,棄去沉淀。調提取液pH值為6.5,加入耐高溫α-淀粉酶15U/5g燕麥麩,95℃攪拌10min,冷卻至室溫。
(4)一次醇析:調節提取液pH值為7.0,加入95%乙醇至溶液中乙醇濃度達到70%,靜置過夜。
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