[發(fā)明專利]一種卡馬西平檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110049830.X
• 申請日: 2011-03-02
• 公開（公告）號: CN102183659A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發(fā)明（設計）人: 虞留明;梁耀銘;李洪波
• 申請（專利權）人: 廣州金域醫(yī)學檢驗中心有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 李柏林

技術領域

本發(fā)明涉及一種檢測方法，特別涉及一種卡馬西平檢測方法。

背景技術

卡馬西平（5H-dibenzo[b,f]azepine-5-carboxamide，?5H-二苯并[b,f]氮雜卓-5-甲酰胺），其結構式如式（Ⅱ）所示。

卡馬西平是一類抗癲癇、穩(wěn)定情緒類藥物，主要用于癲癇癥、躁郁癥以及三叉神經(jīng)痛的治療。卡馬西平具有很多副作用，包括：有可能危及生命的過敏反應；對三叉神經(jīng)有毒可能導致皮膚及內(nèi)臟器官嚴重損害。因此在治療期間對病人的血液藥物水平進行監(jiān)測非常重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種卡馬西平檢測方法。

本發(fā)明所采取的技術方案是：

一種卡馬西平檢測方法，包括以下步驟：

1)??將待測樣本與抗卡馬西平特異性抗體接觸；

2)??根據(jù)待測樣本中的物質(zhì)與抗體的結合情況，判斷樣本中卡馬西平的含量，

其中抗卡馬西平特異性抗體由卡馬西平免疫原免疫動物得到，所述卡馬西平免疫原的結構式如（Ⅰ）所示：

式中，R為連接基團，載體具有免疫原性。

優(yōu)選的，載體為具有免疫原性的蛋白質(zhì)。

R為–O-(CH₂)_n-COO-?，n是1至20之間的整數(shù)，R選為–O-(CH₂)₄-COO-?。

步驟2）使用酶免檢測定法。酶免檢測定法為均相酶免疫測定法或者酶聯(lián)免疫吸附劑測定法。

待測樣本為生理樣本，優(yōu)選為血液樣本。

本發(fā)明的檢測方法，特異性高，可以準確的確定待測樣本中是否存在卡馬西平，同樣可以準確地確定卡馬西平的含量。

附圖說明

圖1是卡馬西平ELISA檢測反應曲線；

圖2是卡馬西平均相酶免疫反應曲線。

具體實施方式

一種卡馬西平檢測方法，包括以下步驟：

1)??????將待測樣本與抗卡馬西平特異性抗體接觸；

2)??????根據(jù)待測樣本中的物質(zhì)與抗體的結合情況，判斷樣本中卡馬西平的含量，

其中抗卡馬西平特異性抗體由卡馬西平免疫原免疫動物得到，所述卡馬西平免疫原的結構式如（Ⅰ）所示：

式中，R為連接基團，載體具有免疫原性。

優(yōu)選的，載體為具有免疫原性的蛋白質(zhì)。雖然其他足夠大的具備免疫原性的物質(zhì)也可以作為載體，但通常情況下選用蛋白質(zhì)作為載體。最常用的免疫原性載體包括血清蛋白，血藍蛋白（KLH）和甲狀腺球蛋白。載體的選擇是本領域技術人員的基本常識。

R為–O-(CH₂)_n-COO-?，n是1至20之間的整數(shù)，R選為–O-(CH₂)₄-COO-?。

下面結合實施例，進一步說明本發(fā)明。

以下實施例中使用的卡馬西平衍生物化學結構如式（Ⅲ）所示。

該卡馬西平衍生物的合成路線如下：

具體的合成步驟如下：

化合物2的合成：

1)??準確稱取2.5?g的亞硝基二磺酸鉀（(KSO₃)₂NO，弗里米鹽（Fremy’s?salt），9.32?mmol）和1.8?g?Na₂HPO₄（12.7?mmol），放入燒杯中，加入95ml雙蒸水溶解，調(diào)節(jié)pH至7.22；稱取0.55g化合物1(12.76?mmol)至60ml?丙酮溶液中；

2)??將上述兩種溶液混合，劇烈攪拌，得到紫色溶液；

3)??將上述紫色溶液加入到丙酮溶液中，持續(xù)攪拌10分鐘，過濾，并置于冰箱中過夜；

4)??將過夜的溶液經(jīng)氬氣旋轉蒸發(fā)儀濃縮，用500ml乙醚進行萃取，萃取完后，將有機相溶劑蒸發(fā)；

5)??將蒸發(fā)殘留物用鍵合硅膠柱進行快速柱層析純化，洗脫劑為4：1比例混合的己烷（Hexane）和氯化四乙銨(Tetraethoxypropane，TEAC)溶液，最后經(jīng)乙醚（Diethyl?ether，Et₂O）重結晶得到的深紅色晶體粉末狀物質(zhì)為亞胺基苯醌化合物2（0.12g，?21%）。

化合物3的合成：