[發(fā)明專利]具毒殺植物線蟲活力的生防真菌Gloeotinia的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110049246.4
• 申請日: 2011-03-02
• 公開（公告）號: CN102250775A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳立杰;段玉璽;趙迪;劉彬;王媛媛;朱曉峰
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于微生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種毒殺植物寄生線蟲的真菌及其制備方法。

背景技術(shù)：

植物寄生線蟲在世界上許多國家和地區(qū)發(fā)生和為害，種類多種多樣。在全球范圍內(nèi)，植物寄生線蟲的發(fā)生與危害隨著農(nóng)林業(yè)的發(fā)展和耕作栽培制度的變化日益嚴重，據(jù)Esser統(tǒng)計，到1990年為止全世界已報道發(fā)現(xiàn)植物寄生線蟲207屬4832種(劉維志，段玉璽.2000.植物病原線蟲學.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，p1-2)。據(jù)估計，植物寄生線蟲造成世界主要農(nóng)作物的年損失率為12.3％，超過1000億美元，而實際的損失遠遠超過估計，理由是許多線蟲造成的危害因沒有剛間可見癥狀或?qū)；蕴卣鞫匆鹱⒁?Sasser，1986)，此外，世界范圍內(nèi)對線蟲為害的新發(fā)現(xiàn)還在不斷增加，而且一些更新的農(nóng)業(yè)栽培體制使線蟲問題更加突出，再者，線蟲與其它生物相互作用而對植物產(chǎn)生的直接或間接影響還在急劇增加。在我國主要有根結(jié)線蟲、大豆胞囊線蟲、松材線蟲、甘薯莖線蟲等病原線蟲造成嚴重危害，尤其根結(jié)線蟲是世界農(nóng)業(yè)上為害最大的一類病原線蟲，病害發(fā)生后，一般減產(chǎn)10％左右，嚴重的高達75％以上，甚至絕收(Whitehead?A.G.，1998.Plant?Nematode?Control.ISBN0851991882CAB?International)。目前，植物寄生線蟲的防治仍以化學防治為主，但近年來化學殺線劑的應(yīng)用浪費大，污染環(huán)境，高毒高殘留，破壞土壤生物區(qū)系等弊端日益為人們所重視(張克勤，何世川，周薇等.1991.真菌和細菌在線蟲生防中的作用及其研究進展.殺蟲微生物.3：55-66)，一些有效的化學殺線劑的應(yīng)用陸續(xù)受到限制，因此對植物寄生線蟲的生物防治研究自然成為熱點問題。

早在60年代Olthof等在觀察食線蟲真菌Arthrobotrys?oligospora?Fres.捕食線蟲的過程中提出了真菌產(chǎn)生殺線蟲代謝物質(zhì)的假說。1984年Thorn等發(fā)現(xiàn)高等擔子菌Pleurotus?spp.產(chǎn)生毒素毒殺線蟲，1992年Kwork等證實該毒素為癸烯二酸，至今從高等真菌的次級代謝物中尋找殺線蟲活性物質(zhì)已成為新的研究熱點。如大黃酚chrysophanol不僅是普遍的植物新陳代謝物而且也廣泛存在灰綠曲霉(Aspergillus?glaucus)、多孢木霉(Trichoderma?polysporum)、鹿角毛殼菌(Chaetomium?elatum)、豌豆深褐斑菌(Ascochyta?pisi)和莖點霉屬菌(Phoma?spp.)中，大黃素emodin分布也廣可從灰綠曲霉許多擔子菌和地衣等真菌中獲得，它們對根結(jié)線蟲有微弱毒性。生物堿phenoxazone首先從血紅密孔菌Pycnoporus?sanguineus中獲得，后來又從虎皮香杏菌Calocybe?gambosa的發(fā)酵菌絲體中分離出對南方根結(jié)線蟲M.incognita的ED50為50μg/ml。環(huán)縮肽白僵菌素beauvericin可從球孢白僵菌Beauveria?bassiana、玫煙色擬青霉Paecilomyces?fumosoroseus和鐮刀屬菌Fusarium?spp.中分離得到，發(fā)現(xiàn)它對M.incognita有微弱活性。1997年，Mayer和Sterner等從奧爾類臍菇Omphalotus?olearius的發(fā)酵液中分離到一高活性環(huán)十二縮肽物質(zhì)omphalotin對根結(jié)線蟲的ED50為0.75μg/ml，比商品殺線蟲劑阿維菌素更具活性而且無抗菌性、不毒害植物，具有商業(yè)利用前景。

真菌產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物具有豐富的結(jié)構(gòu)多樣性，因此真菌作為線蟲的生防因子展現(xiàn)出巨大的發(fā)展前景。本發(fā)明正是基于上述理論，以植物寄生線蟲為靶標，尋找具有高效殺線蟲活性物質(zhì)生防真菌，為進一步研究開發(fā)新型生物殺線蟲劑尋找新的資源。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是篩選獲得對植物線蟲具高殺蟲活性的真菌菌株，將菌株按常規(guī)液體發(fā)酵培養(yǎng)后，從中獲取具殺線蟲活性的代謝產(chǎn)物，開發(fā)新的殺線蟲生物農(nóng)藥，其中，所述的植物線蟲是南方根結(jié)線蟲Meloidogyne?incognita，大豆胞囊線蟲Heterodera?glycines和水稻干尖線蟲Aphelenchoides?besseyi。