[發明專利]一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法

無效

• 申請號: 201110045358.2
• 申請日: 2011-02-25
• 公開（公告）號: CN102649784A
• 公開（公告）日: 2012-08-29
• 發明（設計）人: 李法慶;劉東鋒
• 申請（專利權）人: 蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D317/60
• 分類號: C07D317/60
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明屬于天然藥物提取技術領域，涉及一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，尤其涉及一種應用超臨界萃取法和高速逆流色譜提取純化蓽茇寧的方法。

背景技術：

蓽茇為胡椒科植物蓽茇的近成熟或成熟果穗，是中、蒙醫常用藥材，具有溫中散寒、理氣止痛功能。臨床中不僅用于治療胃脘痛、嘔吐、泄瀉、臍腹痛、牙痛、頭痛，蒙醫還用于治療高脂血癥、冠心病等病。近些年，國內外對蓽茇及其有效成分的認識不斷深入，其藥理作用一直是一些學者的研究熱點。經過數年的研究，從蓽茇中提取得到化學結構明確的單一化合物——蓽茇寧，并且首次發現蓽茇寧具有顯著的降血脂活性。領小等采用熒光分析法對蓽茇中有效成分蓽茇寧進行了研究，結果顯示，蓽茇中蓽茇寧的含量約為0.69％。

蓽茇寧是從蓽茇中提取分離獲得的胡椒堿類衍生物，白色針狀結晶，C₁₆H₁₉NO₃，屬于酰胺類生物堿，弱堿性。

長期以來，由于對蓽茇中各種具體組分的提取存在一定的困難，人們普遍以蓽茇生物堿提取物的形式用于醫學應用。如中國專利(公開號為CN101554409A)“蓽茇生物堿及其制備方法、制劑和用途”，該專利公開了一種采用樹脂技術富集得到蓽茇總生物堿提取物的方法，該方法所得產品是多種生物堿的混合物；中國專利(公開號為CN101791336A)“來自蓽茇的提取物及其制備方法與應用”，該專利公開的方法是醇提、大孔樹脂吸附純化得到蓽茇提取物；中國專利(公開號為CN101863872A)“一種蓽茇堿的提取方法和包含蓽茇堿的藥物組合物”，該專利采用兩次硅膠柱層析和重結晶的方法得到蓽茇堿單體，成本低，但操作繁復，重現性差，收率低。

發明內容：

本發明的目的是提供一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，解決了效率低和產品純度不高的問題。本發明是通過如下的技術方案來實現的：

一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于包括以下步驟：以蓽茇藥材為原料，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO₂萃取，收集蓽茇寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調pH8-10，加入氯仿萃取，萃取液回收氯仿，以氯仿-甲醇-5％鹽酸為兩相溶劑系統，采用高速逆流色譜法進行分離純化，流出物濃縮、低溫干燥即得高含量的蓽茇寧。

所述的醇為90-100％乙醇，用量為20-50ml/100g藥材。

所述超臨界CO₂萃取條件為：萃取溫度為40-55℃，萃取壓力為30-45MPa，CO₂流量為20-50L/h，萃取時間為1-4h，分離釜Ⅰ溫度為35-50℃，壓力為8-10MPa，分離釜Ⅱ溫度為30-45℃，壓力為6-8MPa。

所述的酸水為2-5％的鹽酸或硫酸水溶液，堿為氨水溶液。

所述的氯仿-甲醇-5％鹽酸比例為4-5∶4-6∶3，上相為固定相，下相為流動相。

本發明的提取方法簡單易行、污染少、效率高、樣品損失少、產品純度高，并可保護藥物的穩定性。

下面將結合實施例進一步闡述本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施例。

具體實施方式：

實施例1：

以蓽茇藥材為原料，粉碎，取1kg，加入350ml95％乙醇浸潤1.5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO₂萃取，開啟設備調節參數：萃取溫度為45℃，萃取壓力為30MPa，CO₂流量為30L/h，萃取時間為2.5h，分離釜Ⅰ溫度為35℃，壓力為10MPa，分離釜Ⅱ溫度為30℃，壓力為8MPa，收集蓽茇寧萃取物，用2％的鹽酸或硫酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調pH8，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層回收溶劑，得到蓽茇寧粗品。

以體積比為4∶4∶3的氯仿-甲醇-5％鹽酸為兩相溶劑系統，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當溶劑從管路出口流出時停止泵入固定相，設定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機同時調節分離柱轉速為1000rpm，待管柱內溶劑系統達成動態平衡，用下相溶解蓽茇寧粗品，通過進樣閥進樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含蓽茇寧收集液合并，真空濃縮，低溫干燥即得蓽茇寧6.2g，含量為98.91％。

實施例2：