[發(fā)明專利]一種HCV蛋白酶抑制劑篩選模型

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110043417.2
• 申請日: 2011-02-23
• 公開（公告）號: CN102649819A
• 公開（公告）日: 2012-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙志虎;師明磊;陳娜;閆興;王洋;張彥
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12Q1/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種HCV蛋白酶抑制劑篩選模型，特別涉及一種HCV蛋白酶抑制劑篩選模型的構(gòu)建與應(yīng)用。

背景技術(shù)

丙型肝炎病毒(Hepatitis?C?Virus，HCV)感染嚴(yán)重危害人類生命健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全世界有超過1.7億人受到HCV的慢性感染(Sy?T，Jamal?MM.Epidemiology?of?hepatitis?C?virus(HCV)infection.Int?J?Med?Sci.2006，3(2)：41-6)。我國有約4000萬HCV感染患者，HCV感染已成為嚴(yán)重的世界公共衛(wèi)生問題之一。HCV感染可轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?，甚至發(fā)展為肝硬化和肝癌。當(dāng)前采用的最有效的治療方案是α-干擾素和利巴韋林聯(lián)合治療，但這種治療方法療效低于50％，且費(fèi)用高，副作用大，因此，研制新的抗HCV藥物是當(dāng)前重要而且緊迫的任務(wù)。

HCV屬于黃病毒科(flaviviridae)，其基因組為單股、正鏈RNA。HCV基因組全長約9.6kb，由兩側(cè)非編碼區(qū)(UTR)及位于其間的單一開放閱讀框組成。5′-UTR含有內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(IRES)，非常保守，核糖體與其結(jié)合啟動翻譯過程；3′-UTR對與復(fù)制起始有關(guān)。開放讀碼框編碼大約3010～3033個氨基酸的多聚蛋白前體。該蛋白前體在宿主信號肽酶和病毒蛋白酶的共同作用下生成4個結(jié)構(gòu)蛋白和至少6個非結(jié)構(gòu)(non-structure，NS)蛋白。按順序依次為core-E1-E2-P7-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B。其中，C2，E1，E2，P7為結(jié)構(gòu)蛋白區(qū)，在宿主細(xì)胞信號肽的作用下分別裂解成核蛋白和包膜蛋白；NS2-NS5為非結(jié)構(gòu)蛋白區(qū)。HCV多聚蛋白前體的加工過程是：結(jié)構(gòu)蛋白core，E1，E2和P7被宿主信號肽酶切開，均固定在膜上。NS2的N端也被宿主信號肽酶切開，NS2?94-217位氨基酸與NS3?1-180位氨基酸構(gòu)成NS2/3絲氨酸蛋白酶，在NS2-NS3連接處產(chǎn)生切割(順式切割)，釋放出NS3(NS3?181-631位氨基酸是RNA解旋酶)，NS3絲氨酸蛋白酶對其下游的四個連接位點進(jìn)行切割，釋放出NS4A，NS4B(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)錨定蛋白)，NS5A(RNA結(jié)合蛋白)，NS5B(RNA依賴的RNA聚合酶)(Lorenz?IC，Marcotrigiano?J，Dentzer?TG，et?al.Structure?of?the?catalytic?domain?of?the?hepatitis?C?virus?NS2-3protease[J].Nature，2006，442(7104)：831-835.)。