[發(fā)明專利]用于治療缺血性腦血管疾病的制劑及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110041917.2
• 申請(qǐng)日: 2011-02-21
• 公開（公告）號(hào): CN102641293A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顧麗婭;楊子江;顧茂健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 楊子江
• 主分類號(hào): A61K35/14
• 分類號(hào): A61K35/14;A61K35/28;A61K35/12;A61P9/10;C12N5/0789;A61K38/18
• 代理公司: 上海旭誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種可以治療缺血性腦血管疾病的制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

心腦血管疾病是世界上致死率和發(fā)病率最高的疾病。根據(jù)2010年美國(guó)心臟學(xué)會(huì)的統(tǒng)計(jì)報(bào)告指出，2005年全世界大約有1750萬人死于各類心腦血管疾病，大約占死亡總?cè)藬?shù)的30％。預(yù)計(jì)到2020年，全球因心腦血管疾病死亡人數(shù)將達(dá)2500萬人。在2004年歐洲有430萬人死于各類心腦血管疾病，高達(dá)總死亡人數(shù)的48％。在各類心腦血管疾病中，動(dòng)脈粥樣硬化所導(dǎo)致的血栓及血管堵塞是最常見和最重要的發(fā)病機(jī)理。在疾病初期，由活性氧激發(fā)的對(duì)低密度脂蛋白的修飾會(huì)逐漸導(dǎo)致血管內(nèi)皮機(jī)能障礙。機(jī)體的免疫系統(tǒng)對(duì)此產(chǎn)生慢性炎癥并持續(xù)分泌富含T細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，肥大細(xì)胞的白血球細(xì)胞群，并形成脂紋，纖維斑塊，粥樣斑塊，使血管腔狹窄并導(dǎo)致血流量減少。當(dāng)最終粥樣斑塊破碎后，脫落的碎斑會(huì)導(dǎo)致血小板聚集并產(chǎn)生大規(guī)模的閉合性血栓及其他繼發(fā)性改變，包括由該動(dòng)脈所供應(yīng)養(yǎng)份的組織或器官的缺血或壞死。由動(dòng)脈粥樣硬化所導(dǎo)致的缺血性心腦血管疾病主要包括有冠心病，缺血性中風(fēng)，以及外周閉塞性動(dòng)脈疾病。缺血性中風(fēng)是由血栓(腦部形成阻塞血塊)，栓塞(栓塞從其他地方形成，見下)，系統(tǒng)性供血不足(一般性系統(tǒng)性供血不足，如休克)或靜脈血栓引起的腦部供血不足，導(dǎo)致腦組織功能障礙及壞死。全球每年的中風(fēng)患者有1500萬人，并導(dǎo)致500萬人終身殘疾及570萬人死亡，其中87％屬于缺血性中風(fēng)。在美國(guó)，平均每40秒就有一人會(huì)發(fā)生中風(fēng)，平均每4分鐘就有一名患者死于中風(fēng)。在世界范圍內(nèi)中風(fēng)也是第2大死因。盡管有保守鍛煉，抗凝藥物，和手術(shù)(頸動(dòng)脈內(nèi)膜切除或頸動(dòng)脈血管成形)的傳統(tǒng)治療手段，大部分由動(dòng)脈粥樣硬化所導(dǎo)致的缺血性中風(fēng)病患者依然無法獲得有效的治療，究其原因，主要是因?yàn)閷?duì)抗凝藥物的副作用，以及身體或疾病條件而無法進(jìn)行有效的手術(shù)等。

干細(xì)胞療法是近年來在治療癌癥和心腦血管疾病等領(lǐng)域最受人期待的新發(fā)展方向。從理論上講，干細(xì)胞可以用于各種疾病的治療，但其最適合的疾病主要是組織壞死性疾病如缺血引起的心肌壞死，退行性病變?nèi)缗两鹕C合征，自體免疫性疾病如胰島素依賴型糖尿病等。尤其是其具有的促進(jìn)血管再生和器官功能恢復(fù)的特殊功效，在心腦血管疾病的治療中有著巨大療效。

間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal?stem?cells，MSC)是來源于早期中胚層的一種具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞。MSC理論上可分化為所有中胚層來源的細(xì)胞，例如內(nèi)皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等，并且具有低免疫活性，同種異體移植不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥。MSC廣泛存在于全身結(jié)締組織和器官間質(zhì)中，以骨髓組織中含量最為豐富，也可從胎兒臍血中分離得到，還存在于胎盤、羊水、臍靜脈內(nèi)皮下層、外周血及肝臟、脂肪、肌肉、皮膚等多種組織中。在適宜的條件下，MSC能夠聚集在局灶性腦缺血大鼠缺血區(qū)腦組織中，并具有促進(jìn)缺血區(qū)新生血管形成及改善神經(jīng)功能的趨勢(shì)，新生血管的形成和血液循環(huán)的重建，有助于腦缺血半暗帶區(qū)受損而未死亡神經(jīng)元的修復(fù)，并可為自身神經(jīng)干細(xì)胞向缺血區(qū)遷移和分化，對(duì)損傷神經(jīng)組織的修復(fù)及重建具有重要意義。

而MSC促進(jìn)缺血區(qū)血管新生的原因，是由于來源于MSC的內(nèi)皮祖細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化及提高缺血區(qū)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞活素(例如VEGF)的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)缺血區(qū)血管生成的結(jié)果。事實(shí)上，移植的MSC在參與缺血腦組織修復(fù)中分泌出的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞活素，可借由MSC在體外特定環(huán)境中所分泌的條件培養(yǎng)基中獲得，并完全可能將其應(yīng)用于受損血管及周邊組織的修復(fù)和再生，從而恢復(fù)缺血性壞死的腦組織的相應(yīng)功能。因此，MSC在體外人工環(huán)境中分泌的促血管及周邊組織修復(fù)或再生的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞活素在臨床上有巨大的潛力，可以作為干細(xì)胞療法的有效替代品或輔助藥物應(yīng)用于缺血性腦血管疾病的治療中。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種能夠有效的治療缺血性腦血管疾病的制劑，用于克服現(xiàn)有藥物的不足，為臨床治療缺血性腦血管疾病提供一種新的治療藥物。

上述缺血性腦血管疾病主要指由于動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的血管阻塞類的疾病，具體包括：腦動(dòng)脈硬化引起的中風(fēng)，腦缺血、腦梗塞，腦萎縮，梗塞型癡呆。

本發(fā)明的目的還在于提供一種制備能夠有效的治療缺血性腦血管疾病的制劑的方法，該方法步驟為：

1)從健康人血液中通過白細(xì)胞置換(leukapheresis)獲取外周血單核細(xì)胞，或從骨髓中(通過密度梯度離心的方法，可選步驟)獲取骨髓單核細(xì)胞，或從人脂肪吸取物(lipoaspirate)中直接提取MSC；

2)篩選及培養(yǎng)外周血或骨髓單核細(xì)胞以獲得MSC細(xì)胞；