[發(fā)明專利]一種用于卷煙接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的Ames試驗(yàn)方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110035355.0
• 申請(qǐng)日: 2011-02-10
• 公開（公告）號(hào): CN102095842A
• 公開（公告）日: 2011-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魏玉玲;夭建華;李雪梅;米其利;徐濟(jì)倉(cāng);耿永勤;倪紅梅;繆明明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南煙草科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): G01N33/48
• 分類號(hào): G01N33/48;C12Q1/02
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司 53115
• 代理人: 楊宏珍

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種用于卷煙接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的Ames試驗(yàn)方法，屬煙草技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

卷煙接裝紙雖不參加燃燒，但是卻直接與消費(fèi)者口腔接觸。目前，對(duì)卷煙接裝紙的關(guān)注主要集中于對(duì)其物理指標(biāo)、微生物指標(biāo)、重金屬和品質(zhì)指標(biāo)的規(guī)范^[1～2]。隨著減害降焦的不斷深入，新型卷煙接裝紙不斷出現(xiàn)，需要深入開展卷煙接裝紙安全性研究，從而為卷煙材料監(jiān)管提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論支撐。

用于卷煙接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的樣品制備方法，雖然不是安全性評(píng)價(jià)工作的核心，但卻是所有分析檢測(cè)工作最初的一步。準(zhǔn)確模擬實(shí)際暴露條件，制備卷煙接裝紙?jiān)谌斯ね僖褐械倪w移樣品是影響后續(xù)安全性評(píng)價(jià)客觀性、準(zhǔn)確性及可靠性的關(guān)鍵因素和基本前提。

迄今為止，在國(guó)內(nèi)外未見模擬卷煙接裝紙與口腔接觸的實(shí)際狀況，進(jìn)行接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的Ames試驗(yàn)方法的公開報(bào)道。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華人民共和國(guó)煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC?170-2002《煙用接裝紙?jiān)垺?

[2]中華人民共和國(guó)煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC?171-2002《煙用接裝紙》.

[3]宋瑜冰，宗永立，馬驥，李鵬，張杰，彭書海.一種測(cè)定無煙氣煙草制品中非極性或弱極性香味成分釋放率的方法.專利申請(qǐng)?zhí)?00910227274.3.

[4]中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T?16886.15-2003/ISO?10993-15：2000《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第15部分：金屬與合金降解產(chǎn)物的定性與定量》.

[5]毛友安，李軍，古君品，劉巍，鐘科軍，魏萬之.模擬人體口腔對(duì)吸煙過程中主流煙氣吸收的裝置.專利申請(qǐng)?zhí)?00910226704.X.

[6]李雪梅，曾曉鷹，崔楊，楊葉昆，者為，段焰青，耿永勤，王明峰.一種全煙氣捕集及其pH值測(cè)定的方法.專利申請(qǐng)?zhí)?01010123588.1.

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)便、實(shí)用的用于卷煙接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的Ames試驗(yàn)方法。

本發(fā)明的一種用于卷煙接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的Ames試驗(yàn)方法，包括樣品原液制備及Ames試驗(yàn)，具體步驟如下：

a.采用中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T?16886.15-2003/ISO?10993-15：2000《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第15部分：金屬與合金降解產(chǎn)物的定性與定量》規(guī)定的人工唾液作為卷煙接裝紙的浸提液；

b.量取一定面積的卷煙接裝紙(如：量取卷煙接裝紙600cm×6cm，相當(dāng)于500支卷煙的接裝紙用量；量取300cm×6cm，相當(dāng)于250支卷煙的接裝紙用量；量取卷煙接裝紙240cm×6cm，相當(dāng)于200支卷煙的接裝紙用量；量取卷煙接裝紙120cm×6cm，相當(dāng)于100支卷煙的接裝紙用量；量取60cm×6cm，相當(dāng)于50支卷煙的接裝紙用量)，剪成1cm×6cm的條狀，置于具有磨口塞的50～250mL錐形瓶中備用；

c.按照裝紙面積/浸提液比例為24～36cm²/mL向錐形瓶中注入浸提液，當(dāng)卷煙接裝紙全部浸入后蓋好塞子；

d.模擬實(shí)際暴露條件，設(shè)置浸提溫度為37±1℃；

e.將該錐形瓶置于37±1℃的水浴震蕩器中震蕩浸提5～180min，得到樣品原液；

f.將e步驟得到的樣品原液進(jìn)行鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)，即：分別按10μL，50μL，250μL，500μL，1000μL摻入平板，分別計(jì)數(shù)TA?97、TA?98、TA?100、TA?102四個(gè)菌種在劑量下的回復(fù)突變菌落數(shù)；

g.根據(jù)Ames試驗(yàn)結(jié)果判別卷煙接裝紙材料是否具有致突變作用，用于評(píng)價(jià)卷煙接裝紙的安全性。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：能有效模擬抽吸卷煙時(shí)接裝紙與口腔接觸的實(shí)際狀況制備樣品，所選擇的用于Ames試驗(yàn)的樣品原液劑量范圍合適，方法實(shí)用、簡(jiǎn)便。

附圖說明：

附圖為用于卷煙接裝紙生物學(xué)評(píng)價(jià)的Ames試驗(yàn)方法工藝流程圖。

具體實(shí)施方式：

下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)描述，但并不限制本發(fā)明。

實(shí)例一??用于HH卷煙接裝紙?jiān)u價(jià)

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1試驗(yàn)材料及其制備

參照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T?16886.15-2003/ISO?10993-15：2000《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第15部分：金屬與合金降解產(chǎn)物的定性與定量》規(guī)定的人工唾液制備方法，配制與口腔接觸的卷煙接裝紙的浸提液。