[發明專利]一種微生物飼料添加劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201110034029.8
• 申請日: 2011-01-31
• 公開（公告）號: CN102106463A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發明（設計）人: 宋偉;楊永浩;于鐵龍
• 申請（專利權）人: 上海大譽生物技術股份有限公司
• 主分類號: A23K1/16
• 分類號: A23K1/16;C12N1/20;C12R1/245;C12R1/23;C12R1/25
• 代理公司: 上海東創專利代理事務所(普通合伙) 31245
• 代理人: 馬云;曹立維

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，涉及一種含有干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌及相應的吸附載體的復合微生物飼料添加劑及其制備方法。

背景技術

目前養殖業所面臨的一個比較重要的問題就是：眾多生長素類及藥物類飼料添加劑的使用造成大量藥物殘留，從而造成禽畜肉類品種下降，同時由于藥物的富集作用，造成位于食物鏈上層的食用者食用后藥物大量富集，從而引起細菌耐藥性增強，直接或間接地影響人類的健康。如何采用一些新型的飼料添加劑以減少藥物型飼料添加劑的副作用，同時又能在一定程度上替代部分藥物型飼料添加劑，是當前以及將來較長一段時間內的研究方向。

發明內容

本發明的目的是提供一種由多菌種組成的復合型微生物飼料添加劑。

本發明的另一個目的是提供一種由多菌種組成的復合型微生物飼料添加劑的制備方法。

本發明是由如下技術方案實現的：

一種微生物飼料添加劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)在厭氧操作箱中通過選擇性培養基對干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌及植物乳桿菌進行純化分離操作，各菌株純化分離條件為：

干酪乳桿菌：選用LC培養基作為選擇性培養基，其成分為：0.1％酵母膏、1％蛋白胨、0.4％Lab?Lemco(牛肉膏)、0.2％磷酸二氫鉀、0.3％乙酸鈉、0.02％結晶硫酸鎂、0.005％結晶硫酸錳、0.1％吐溫80、0.1％檸檬酸銨、0.1％干酪素酸性水解物、1.2％瓊脂，以上為質量百分含量；調節pH值6.0～6.4；115℃，45min滅菌；培養溫度為28℃～35℃；培養時間20～24h。

嗜酸乳桿菌：選用改良TJA培養基作為選擇性培養基，其成分為：5％番茄汁、0.5％酵母膏、1％牛肉浸膏、2％乳糖、0.2％葡萄糖、0.1％吐溫80、0.5％乙酸鈉、1.2％瓊脂，以上為質量百分含量；調節調節pH值6.6～7.0；115℃，45min滅菌；培養溫度為28℃～35℃；培養時間20～24h。

植物乳桿菌：選用MRS肉湯作為選擇性培養基，其成分為：1％蛋白胨、1％肉膏、0.5％酵母膏、2％葡萄糖、0.2％磷酸二氫鉀、0.2％檸檬酸氫二銨、0.5％乙酸鈉、0.058％結晶硫酸鎂、0.025％結晶硫酸錳、0.05％半胱氨酸、0.1％吐溫80、1.2％瓊脂，以上為質量百分含量；調節pH值6.1～6.5；115℃，45min滅菌；培養溫度為25℃～30℃；培養時間20～24h。

(2)在厭氧操作箱中將步驟(1)中經分離純化的菌種分別轉入酵母膏蛋白胨培養基(液體)中進行擴容培養，其成分為：0.5％酵母膏、0.5％蛋白胨、0.05％氯化鈉、0.05％磷酸氫二鉀、0.05％硫酸鎂、0.05％碳酸鈣、0.1％吐溫-80、10％紅糖，以上為質量百分含量；調節pH值6.0～6.4；115℃，45min滅菌；培養溫度為28℃～35℃；培養時間20～24h。

(3)將步驟(2)中經過純化擴容后的各菌種分別接種入工業發酵罐中進行發酵，各微生物組分的發酵條件為：

干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌，培養基成分以質量百分比計為：0.5％酵母膏、0.5％蛋白胨、0.05％氯化鈉、0.05％磷酸氫二鉀、0.05％硫酸鎂、0.05％碳酸鈣、0.1％吐溫-80、10％紅糖(C₁₂H₂₂O₁₁)，調節pH值6.0～6.4，培養溫度為28℃～35℃；培養時間20～24h。

植物乳桿菌，培養基成分以質量百分比計為：0.5％酵母膏、0.5％蛋白胨、0.05％氯化鈉、0.05％磷酸氫二鉀、0.05％硫酸鎂、0.05％碳酸鈣、0.1％吐溫-80、10％紅糖(C₁₂H₂₂O₁₁)，調節pH值6.0～6.4，培養溫度為23℃～28℃；培養時間20～24h。

(4)將步驟(3)中獲得的各個菌種組分培養液按照1∶0.8～1∶1.2～1.4的體積比進行混合后，再用吸附載體進行吸附，各菌種組分培養液總量與吸附載體的體積質量比為1(L)∶1.3～1.5(kg)。

(5)步驟(4)中所述的吸附載體是食品級玉米淀粉，或以食品級玉米淀粉為主，并輔以紅糖、白糖或赤砂糖等糖類(包括以糖漿形式存在的糖類)的一種或數種的混合物。其中糖類所占質量百分比為8％～15％。

(6)用低溫干燥設備對步驟(4)中的混合物進行干燥，干燥環境溫度控制在28℃～35℃，經低溫連續干燥后，使含水率為10％以下，粉碎至細度40～60目，即為成品。