[發明專利]逆流色譜儀及其專用逆流色譜柱

無效

• 申請號: 201110031902.8
• 申請日: 2011-01-28
• 公開（公告）號: CN102175803A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 楊福全;蔡潭溪;謝振聲;薛鵬;郭曉靜;陳秀蘭;吳鵬
• 申請（專利權）人: 中國科學院生物物理研究所
• 主分類號: G01N30/60
• 分類號: G01N30/60;G01N30/42
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種逆流色譜儀及其專用逆流色譜柱，屬于逆流色譜技術領域。

背景技術

逆流色譜技術(countercurrent?chromatography，CCC)是在二十世紀六十年代由美國國立衛生研究院(NIH)、國立心、肺和血液研究所的伊東洋一郎(Yoichiro?Ito)博士發明的一種高效的液-液分配色譜分離技術，已廣泛應用于天然產物、中藥活性成分的制備性分離純化。逆流色譜技術使用不相混溶的兩相溶劑系統，被分離物質依據其在兩相溶劑系統中的分配系數的不同而實現分離。由于不使用固體支持介質，因而避免了被分離物質的不可逆吸附、死活、變性等。逆流色譜技術流動相和固定相的選擇具有較大的靈活性，因此能夠用于從脂溶性到水溶性較大極性范圍的化合物的分離純化。現有的高速逆流色譜儀器對于常用的有機-水兩相溶劑系統(如氯仿-甲醇-水，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水)等具有較好的固定相保留，對于極性較大的溶劑系統，如正丁醇-乙酸-水系統以及雙水相溶劑系統，其固定相的保留則非常低。雙水相溶劑系統已廣泛用于細胞分離、蛋白質分離和膜蛋白質富集，但多采用人工或簡單玻璃裝置實現。現有的逆流色譜儀色譜柱由多個螺旋刻槽盤組合而成。利用正丁醇-乙酸-水系統可以實現多肽等極性化合物的高效制備分離。但其缺點是各層之間容易發生液體泄露，從而嚴重影響分離效率，使其應用受到限制。

發明內容

本發明的目的是提供一種逆流色譜儀及其專用逆流色譜柱。

本發明提供的一種逆流色譜柱，它包括圓盤體、與所述圓盤體密封配合的圓盤蓋以及貫穿所述圓盤體和圓盤蓋的中心的中空自傳軸，所述中空自轉軸與所述圓盤體和圓盤蓋固定連接；所述圓盤體內設有至少一條螺旋形刻槽；沿所述螺旋形刻槽的徑向方向上設有連通所述螺旋形刻槽的內端和外端的貫通通道；一條供液體流通的管路，鋪設在所述螺旋形刻槽內，所述管路在所述螺旋形刻槽內至少鋪設一層；所述管路通過所述中空自轉軸引入和引出所述圓盤體。

上述逆流色譜柱中，所述螺旋形刻槽可為一條，所述管路從所述螺旋形刻槽的內端沿著所述螺旋形刻槽繞到所述螺旋形刻槽的外端，然后通過所述貫通通道回到所述螺旋形刻槽的內端開始下一層盤繞，最后從所述螺旋形刻槽的內端引出所述圓盤體。

上述逆流色譜柱中，所述螺旋形刻槽可為多條，多個內端和多個外端之間在所述圓盤的圓周方向上均相隔一段距離，且沿所述螺旋形刻槽的徑向方向上的相鄰兩條所述螺旋形刻槽的內端和外端通過所述貫通通道連通(其中，一條螺旋形刻槽的內端和另一條螺旋形刻槽的外端通過所述貫通通道連通)；所述管路從第一條所述螺旋形刻槽的內端沿著所述螺旋形刻槽繞到所述螺旋形刻槽的外端，然后通過所述貫通通道回到第二條所述螺旋形刻槽的內端開始進行第二條所述螺旋形刻槽的盤繞，重復以上盤繞過程直至盤繞完同層多條所述螺旋形刻槽；然后開始下一層的盤繞，最后所述管路從所述螺旋形刻槽的內端引出所述圓盤體。

上述逆流色譜柱中，所述螺旋形刻槽為四條，四個內端和四個外端之間在所述圓盤的圓周方向上均勻分布。

上述逆流色譜柱中，所述貫通通道的橫切面為圓弧形或直線形。

上述逆流色譜柱中，所述管路的材質可為金屬、尼龍、聚四氟乙烯或聚乙烯。

本發明提供的一種逆流色譜儀，它包括上述逆流色譜柱、配重體和中空公轉軸；所述配重體上設有貫穿其中心的自轉軸且與所述逆流色譜柱的重量相等；所述中空公轉軸上設有上下排列且平行的行星旋轉架，所述逆流色譜柱和配重體分別通過所述中空自轉軸和自轉軸對稱地固定在所述行星旋轉架上；所述管路穿過所述中空公轉軸開口于所述中空公轉軸外；所述中空公轉軸上固定有中心輪，所述中空自轉軸和自轉軸上均固定有與所述中心輪相配合的行星輪。

上述逆流色譜儀中，所述逆流色譜儀設于恒溫機箱內，用于提供實驗所需的恒溫環境；所述中空公轉軸貫穿所述恒溫機箱的頂部和底部的中心且與所述中空公轉軸固定連接。

上述逆流色譜儀中，所述中空自轉軸和自轉軸均通過軸承于所述行星旋轉架固定連接。

上述逆流色譜儀中，所述中空公轉軸與轉動裝置、電機和速度控制器相連，以提供旋轉所需的動力。

本發明提供的新型逆流色譜儀和逆流色譜柱對極性有機-水兩相溶劑系統(如正丁醇-乙酸-水，4∶1∶5，v/v)有較高的固定相保留，可以實現多肽、皂甙等極性化合物快速分離純化；對于雙水相溶劑系統的固定相保留也有較大的提高，適合于細胞的分離、質膜的分離富集、亞細胞器的分離純化，以及蛋白質等生物大分子的分離純化等。

附圖說明

圖1為本發明實施例1的逆流色譜儀的結構示意圖。