[發(fā)明專利]全血INF-γ的特異性抗原蛋白、其制備方法及用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110031079.0
• 申請日: 2011-01-27
• 公開（公告）號: CN102174114A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 喻德華;黃俊;趙平峰;陳銀芳
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢海吉力生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;G01N33/569;C12R1/19
• 代理公司: 武漢帥丞知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42220
• 代理人: 朱必武

1.全血INF-γ的特異性抗原蛋白，其特征在于：它為以下任一一種連接有生物標(biāo)簽的融合蛋白：ESAT-6-連接肽-CFP-10、CFP-10-連接肽-ESAT-6、ESAT-6-連接肽-MPB64、MPB64-連接肽-ESAT-6、CFP-10-連接肽-MPB64、MPB64-連接肽-CFP-10、ESAT-6-連接肽-CFP-10-連接肽-MPB64、ESAT-6-連接肽-MPB64-連接肽-CFP-10、CFP-10-連接肽-ESAT-6-連接肽-MPB64、CFP-10-連接肽-MPB64-連接肽-ESAT-6、MPB64-連接肽-CFP-10-連接肽-ESAT-6和MPB64-連接肽-ESAT-6-連接肽-CFP-10，其中所述的連接肽為不影響ESAT-6、CFP-10和MPB64免疫原性的短肽。

2.如權(quán)利要求1所述的全血INF-γ的特異性抗原蛋白，其特征在于：所述生物標(biāo)簽為組氨酸標(biāo)簽、GST標(biāo)簽或Trx標(biāo)簽。

3.如權(quán)利要求1所述的全血INF-γ的特異性抗原蛋白，其特征在于：所述的連接肽的氨基酸序列為SEQ?ID：No.3。

4.如權(quán)利要求1所述的全血INF-γ的特異性抗原蛋白，其特征在于：氨基酸序列為SEQ?ID：No.1。

5.編碼權(quán)利要求1所述的全血INF-γ的特異性抗原蛋白的核苷酸序列。

6.編碼權(quán)利要求4所述的全血INF-γ的特異性抗原蛋白的核苷酸序列SEQID?NO：2。

7.包含權(quán)利要求6所述的核苷酸序列的載體，其中載體為pET28b。

8.包含權(quán)利要求7所述的載體的微生物，其中微生物為大腸桿菌BL21。

9.制備權(quán)利要求4所述的特異性抗原蛋白的方法，包括如下步驟：SEQ?ID?NO：2序列保存于DH5α中，用NcoI、XhoI內(nèi)切酶分別酶切DH5α和pET28b表達(dá)載體，回收SEQ?ID?NO：2序列片斷和pET28b表達(dá)載體，在T4DNA連接酶作用下進(jìn)行連接，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)中，轉(zhuǎn)化子在液體LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)，加入終濃度為50μg/ml的氨芐青霉素培養(yǎng)，加入終濃度為0.5mM的IPTG，37℃，200rpm，誘導(dǎo)表達(dá)8小時(shí)，將所表達(dá)重組蛋白收集、純化即得。

10.權(quán)利要求1-4任一所述的抗原蛋白在制備診斷結(jié)合病藥物中的用途。