[發明專利]一種兩性離子親水色譜固定相及其制備方法

有效

• 申請號: 201110030643.7
• 申請日: 2011-01-28
• 公開（公告）號: CN102614847A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 梁鑫淼;沈愛金;郭志謀
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: B01J20/288
• 分類號: B01J20/288;B01J20/30
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

技術領域

本發明涉及一種新型液相色譜固定相及其制備方法，具體地說是一種鍵合相末端為兩性離子官能團的新型親水作用色譜固定相。?

技術背景

親水作用液相色譜模式(HILIC)是近年來發展起來的用于分離強極性化合物的色譜技術[Alpert，A.J.J.Chromatogr.1990，499，177-196；Strege，M.A.Anal.Chem.1998，70，2439-2445；Strege，M.A.et?al，Anal.Chem.2000，72，4629-4633；Wang，X.D.et?al，J.Chromatogr.A，2005，1083，58-62]。親水作用色譜的固定相的研發是親水作用色譜發展和應用的基礎。傳統的正相色譜固定相，如硅膠，氨基，氰基等可直接用于親水作用色譜[Guo，Y.et?al，J.Chromatogr.A，2005，1074，71-80；Garbis，S.D.et?al，Anal.Chem.2001，73，5358-5364]，但存在著重現性差和使用壽命短的問題。近年來專門用于親水作用色譜的新型極性固定相得到了較大發展，包括酰胺類、羥基類、兩性離子類等[Guo，Y.et?al，J.Chromatogr.A，2005，1074，71-80；Irgum，K.et?al，J.Sep.Sci.，2006，29，1784-1821；Jandera，P.，J.Sep.Sci.，2008，31，1421-1431]。發展新型色譜固定相是親水作用色譜研究和應用的重要方面。?

巰基-烯烴和巰基-炔烴在自由基引發劑的催化下發生的自由基點擊反應在小分子和聚合物的合成和修飾中得到了廣泛的應用[Bowman，C.N.et?al，Chem.Soc.Rev，2010，39，1355-1387]。此類點擊反應具有簡單，高選擇性，高轉化率等特性，十分適合于制備色譜固定相。?

兩性離子化合物具有很好的極性和親水性，十分適合作為親水作用色譜固定相。傳統的兩性離子親水色譜固定相其正負電荷中心垂直分布于固體基質表面，固定相表面電荷狀態不容易調節[W.Jiang?et?al，J.Chromatogr.A，2006，1127，82-91]。基于末端為兩性離子官能團的化合物制備的兩性離子親水作用色譜固定相其正負電荷中心平行于固體基質表面，表面正負電荷可以通過改變pH值進行調控和優化。當前，尚沒有此類兩性離子親水作用色譜固定相的報道和產品。?

發明內容

本發明的目的是提供一種新型高效液相色譜固定相及其制備方法。該固定相為鍵合相末端為兩性離子官能團的新型親水作用色譜固定相。該固定相的制備方法簡單，用途廣泛。?

本發明的技術方案是：高效液相色譜固定相，其特征在于結構為：?

其中SiO₂為硅膠，?是氨基酸、多肽、或者蛋白質中的一種，n＝0～4，R₂是乙烯基或乙炔基，X⁺代表氨基正離子，Y^-代表羧基負離子。?

本發明還提供了上述固定相的制備方法，其特征在于包括如下步驟：?

a.硅膠預處理：硅膠加入濃度為1～38wt％的鹽酸或硝酸溶液中，加熱回流攪拌1～48小時，過濾，水洗至中性，于100～160℃下干燥至恒重。所得干燥硅膠置于濕度為20％～80％的氮氣或氬氣氣氛中24～72小時，使硅膠吸水增重原重量的0.5％～10％。?

b.硅膠表面聚合：將步驟a所得水合硅膠置于玻璃或者聚四氟乙烯反應容器中，在氮氣氛圍下加入有機溶劑，攪拌均勻，滴加烯基或炔基硅烷，保持溫度為20～200℃條件下攪拌2～48小時。反應體系冷卻至室溫，減壓過濾并用甲苯、二氯甲烷、甲醇、水、四氫呋喃、甲醇洗滌，固體產品在60～100℃條件下干燥12～24小時即得烯基或炔基硅膠。?

所用有機溶劑為與水不互溶的有機溶劑，包括甲苯、乙苯、二甲苯、正己烷、正庚烷、正戊烷、正辛烷、環己烷等苯系物和烷烴。有機溶劑的使用量為每克水合硅膠使用2mL～100mL有機溶劑。?

所用的烯基或炔基硅烷試劑具有如下的結構：?

或?

其中，n＝0～4。烯基或炔基硅烷的使用量為每克水合硅膠使用0.5mmol～5mmol。?