[發(fā)明專利]一種純化賽門苷Ⅰ的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110029165.8
• 申請日: 2011-01-24
• 公開（公告）號: CN102180930A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于天然藥化分離領(lǐng)域，特別是涉及一種利用高速逆流色譜純化賽門苷Ⅰ的方法。

背景技術(shù)：

賽門苷Ⅰ(sianenoside?Ⅰ)屬于葫蘆烷三萜甙類化合物，分子式C₅₄H₉₂O₂₄，分子量1125.29，CAS號126105-12-2，分子結(jié)構(gòu)

賽門苷Ⅰ是一種從羅漢果中提取的甜味成分，賽門甙Ⅰ的萬分之一濃度的水溶液是蔗糖的563倍，具有抗癌的作用，抑制LDL的氧化作用，對糖尿病人有輔助療效。美國西太平洋防癌基金會已將其低含量的賽門苷Ⅰ指定為防癌治癌的藥物。

賽門苷Ⅰ分離純化方法較少，所得產(chǎn)品一般為粗提物，多采用水提取或醇提取，上大孔樹脂分離，陽離子樹脂脫色等，如李雁群等采用國產(chǎn)材料和較為簡單的方法來提取和純化羅漢果甜苷，以水為溶劑的甜苷得率比乙醇水溶液的得率高，溶劑量以原料重6倍為宜；氫氧化鈣作澄清劑澄清，強堿樹脂脫色，AB-8吸附樹脂吸附羅漢果甜苷，50％乙醇水溶液解吸。純化賽門苷Ⅰ的方法多是采用硅膠柱層析分離和制備液相分離，如文獻“羅漢果化學(xué)成分研究”，該文獻采用75％乙醇回流提取，石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，氯仿萃取經(jīng)兩次硅膠柱層析，在氯仿石油醚重結(jié)晶，得到純品賽門苷Ⅰ。現(xiàn)有純化賽門苷Ⅰ工藝存在制備量較小，重現(xiàn)性差的技術(shù)缺陷。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種純化賽門苷Ⅰ的方法，該方法易重現(xiàn)，制備量大。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種純化賽門苷Ⅰ的方法，其特征在于包括以下步驟：

1)將羅漢果粉碎，加入5-15倍量40-60％甲醇提取2-3次，提取液減壓回收甲醇，母液加適量水分散濾過，加入大孔樹脂柱吸附，4-6BV40-60％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，得濃縮液；

2)上述濃縮液加甲醇至醇濃度50-70％，加活性炭共沸，脫色液濾過，加氯仿攪拌均勻靜置分層，收集氯仿層，回收氯仿，得粗品；

3)上述粗品選用乙酸乙酯-正丁醇-磷酸水(pH2-3)溶液系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，收集流分，減壓干燥即得賽門苷Ⅰ純品。

所述步驟1)中的提取方式可選冷浸或超聲提取。

所述步驟1)中的大孔樹脂型號可選HZ818、SPD-400或LSA-40中的一種。

所述步驟3)中的乙酸乙酯-正丁醇-磷酸水(pH2-3)溶液系統(tǒng)比例為：3-5∶2-4∶5-6。

本發(fā)明采用冷浸或超聲提取可以減少色素和蛋白的溶出，大孔樹脂吸附富集，醇溶液中氯仿萃取，提高了粗品中賽門苷Ⅰ的含量，可以減少直接萃取氯仿的用量，再采用高逆流色譜分離，可以提高產(chǎn)品收率，減少有機毒性試劑的用量以及對環(huán)境的污染。

下面將結(jié)合具體實施方式進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1

羅漢果干果粉碎，取1kg，加入15倍量40％甲醇冷浸提取12小時，濾出提取液，再加5倍量40％甲醇冷浸8小時，合并提取液減壓回收甲醇，母液加適量水分散濾過，加入HZ818大孔樹脂柱吸附，水洗樹脂至無糖色，取4BV60％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，濃縮液加甲醇至醇濃度50％，加1％的活性炭共沸1小時，脫色液濾過，加1/3體積的氯仿攪拌均勻靜置分層，收集氯仿層，回收氯仿，得粗品5g。取用乙酸乙酯、正丁醇、磷酸水(pH2)溶劑按3∶2∶5混合，取上相注入高速逆流色譜儀螺旋管中，啟動主機，把轉(zhuǎn)速調(diào)至800r/min，以流速2ml/min泵入下相，用下相溶解粗品注入進樣閥，收集賽門苷Ⅰ流分，減壓干燥得賽門苷Ⅰ產(chǎn)品，含量98.5％。

實施例2

羅漢果干果粉碎，取1kg，加入10倍量60％甲醇超聲提取2小時，濾出提取液，再加5倍量60％甲醇超聲提取1小時，合并提取液減壓回收甲醇，母液加適量水分散濾過，加入SPD-400大孔樹脂柱吸附，水洗樹脂至無糖色，取6BV40％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，濃縮液加甲醇至醇濃度70％，加0.5％的活性炭共沸1小時，脫色液濾過，加1/2體積的氯仿攪拌均勻靜置分層，收集氯仿層，回收氯仿，得粗品3g。取用乙酸乙酯、正丁醇、磷酸水(pH3)溶劑按4∶3∶6混合，取上相注入高速逆流色譜儀螺旋管中，啟動主機，把轉(zhuǎn)速調(diào)至900r/min，以流速3ml/min泵入下相，用下相溶解粗品注入進樣閥，收集賽門苷Ⅰ流分，減壓干燥得賽門苷Ⅰ產(chǎn)品，含量98.1％。

實施例3：