[發明專利]c-Met基因的siRNA片段及其運用

無效

• 申請號: 201110021761.1
• 申請日: 2011-01-19
• 公開（公告）號: CN102154292A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 姬長友;劉蓉蓉;霍文謙;陳繼川;李洪濤
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三軍醫大學第三附屬醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

技術領域

本發明涉及基因治療領域，特別涉及c-Met基因的siRNA片段及其運用。

背景技術

喉癌占全身惡性腫瘤的1%～5%，是頭頸部最常見的腫瘤之一，占頭頸部腫瘤的13.9％，我國部分地區發病率約為1.5～3.4/10萬人，已成為嚴重威脅人民生命健康和生活質量的疾病，以鱗癌多見。雖然近幾十年來傳統的治療方式如手術、放療、化療等已有很大改進，提高了患者的五年生存率，但手術治療易使患者的喉功能嚴重破壞而致殘；放療僅對早期喉癌療效好，對于大多數就診時即為中、晚期或治療后又出現復發、轉移的患者往往效果不佳；而化療又由于毒副作用嚴重常使得患者無法耐受，從而使這些治療方式仍受到很大限制。因此，積極尋求治療喉癌的新途徑即成為耳鼻咽喉科研究者面臨的新課題。

肝細胞生長因子(Hepatocyte?growth?factor，HGF)是一種多功能的細胞因子，為一種多肽，其生物學活性由?c-Met?蛋白所介導。c-Met蛋白屬酪氨酸激酶活性的生長因子受體，研究發現其在促進細胞增殖分化、細胞擴散、新生血管的生成方面具有重要作用。異常表達的c-Met激活下游分子導致腫瘤的發生、發展和轉移。研究表明?c-Met在喉癌中強表達，與喉癌的增殖及轉移關系密切。RNA?干擾技術具有特異、有效的基因沉默效應，能夠簡單、高效地抑制特定基因的表達，目前已成為腫瘤基因治療研究的熱點。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的之一在于提供一種siRNA片段，該片段通過RNAi方法沉默c-Met基因表達，從而達到抑制HGF-c-Met信號轉導系統，發揮抑制

腫瘤功能。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：

c-Met基因的siRNA片段，具有如下任一序列：

序列1：

正義鏈(RNAi-1F)：

5'-GATCCGTATCAGCTTCCCAACTTCACCGTCAAGAGCGGTGAA

GTTGGGAAGCTGATACTTTTTA?-3’；

反義鏈(RNAi-1R)：

3′-GCATAGTCGAAGGGTTGAAGTGGCAGTTCTCGCCACTTCAACC

CTTCGACTATGAAAAATTCGA-5′；

序列2：

正義鏈(RNAi-2F)：

5′-GATCCGCAAGCCAGATTCTGCCGAACCATCAAGAGTGGTTCGGC

AGAATCTGGCTTGCTTTTTA-3′；

反義鏈(RNAi-2R)：

3′-GCGTTCGGTCTAAGACGGCTTGGTAGTTCTCACCAAGCCGTCTTA

GACCGAACGAAAAATTCGA?-5′；

序列3：

正義鏈(RNAi-3F)：

5′-GATCCGGAGGGACAAGGCTGACCATATGTCAAGAGCATATGGT

CAGCCTTGTCCCTCCTTTTTA-3′；

反義鏈(RNAi-3R)：

3′-GCCTCCCTGTTCCGACTGGTATACAGTTCTCGTATACCAGTCGG

AACAGGGAGGAAAAATTCGA-5′。

本發明的目的之二在于提供一種siRNA?重組質粒，其根據?Genbank?中報道的c-Met基因核苷酸序列，參考?siRNA?設計原則設計并構建的重組質粒。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：

c-Met基因siRNA?重組質粒，其含有如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2或SEQ?ID?NO.3任一序列的c-Met基因的siRNA片段。

進一步，c-Met基因siRNA?重組質粒pSilencer2.0-c-Met-shRNA2如SEQ?ID?NO.10所示。

本發明的另一目的在于提供c-Met基因的siRNA片段的用途，該用途為抗腫瘤提供了一種新思路。

具體方案為：

c-Met基因的siRNA片段用于制備治療腫瘤藥物的用途。

進一步，c-Met基因的siRNA片段用于制備治療喉癌藥物的用途。

本發明的目的之四提供了c-Met基因siRNA?重組質粒的用途，該用途為抗腫瘤提供了一種新思路。

其具體方案為：

c-Met基因siRNA?重組質粒用于制備治療腫瘤藥物的用途。

進一步，c-Met基因siRNA?重組質粒用于制備治療喉癌藥物的用途。