[發(fā)明專(zhuān)利]一種大花萱草“御衣黃”花蕾的組培方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110021215.8
• 申請(qǐng)日: 2011-01-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102144550A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 祝志勇;何月秋;王志龍;林樂(lè)靜
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 寧波城市職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 寧波奧圣專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及大花萱草組織培育技術(shù)，具體涉及一種大花萱草“御衣黃”花蕾的組培方法。

背景技術(shù)

大花萱草（Hemerocallis?middendorfii）是百合科萱草屬多年生宿根草本植物，色彩華麗，葉似蘭草，花如百合，花期較長(zhǎng)。大花萱草花色品種繁多，有淡黃，金黃，鵝黃，淺紅，大紅，深紅等顏色，更有粉色相間和紅黃相間的復(fù)色。近幾年，我國(guó)陸續(xù)從國(guó)外引進(jìn)大花萱草新品種滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，其中的大花萱草“御衣黃”是剛引入的新品種，花形較大，花色為醒目的橙黃色，6月初開(kāi)花持續(xù)到十月上旬，花期長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月，適應(yīng)性強(qiáng)管理較粗放，同時(shí)“御衣黃”在江浙地區(qū)四季常綠，在大花萱草中頗為稀少；它不僅是優(yōu)秀的地被植物，而且還可應(yīng)用于庭院綠化，盆栽觀(guān)賞，花境設(shè)計(jì)以及藝術(shù)插花中，具有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。“御衣黃”品種自然結(jié)實(shí)率低，種子萌芽率低，目前采用分株等無(wú)性繁殖方式，繁殖率低，一般年增殖系數(shù)為4-5，很難滿(mǎn)足市場(chǎng)商業(yè)化的需求。組織培養(yǎng)技術(shù)是大量快速繁殖優(yōu)良種質(zhì)的最有效途徑，同時(shí)也是植物進(jìn)行遺傳改良的重要基礎(chǔ)；如郭達(dá)初等在1990年，就以大花萱草雜交品種的花莖為外植體，以MS+IBA0.4mg·L-1?+BA4.0mg·L?-1誘導(dǎo)愈傷組織，并在不同外源激素下比較不定芽的增殖情況，獲得最佳的增殖培養(yǎng)基MS+NAA1.0mg·L-1?+BA5.0mg·L?-1，成功獲得生根苗。王漢海等也以莖尖為外植體，成功獲得大花萱草“金娃娃”品種組培苗。但對(duì)“御衣黃”的組培研究尚未見(jiàn)報(bào)道，因此探索”御衣黃”的組培技術(shù)，實(shí)現(xiàn)其規(guī)模化繁殖，不但可豐富園林綠化植物品種，滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，也對(duì)百合科其它植物的組培技術(shù)研究具有重要的借鑒意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種大花萱草“御衣黃”花蕾的組培方法，該方法具有滅菌效果較好，死亡率較低，不定芽培育周期短和質(zhì)量較好的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：一種大花萱草“御衣黃”花蕾的組培方法，包括下述步驟：

a、于晴天中午采下形成一周以?xún)?nèi)的大花萱草“御衣黃”花蕾，先用洗潔精浸泡1h，后用流水沖洗4～5次，再用質(zhì)量百分濃度為75%的乙醇浸泡30秒，然后用質(zhì)量百分濃度為0.1%的HgCl₂溶液浸泡10分鐘，無(wú)菌水沖洗5～6次，得到無(wú)菌花蕾；

b、切除上述無(wú)菌花蕾的頂部露出子房，然后對(duì)半切開(kāi)，再接種于含有6-芐基嘌呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）和蔗糖的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)培養(yǎng)55～66天，愈傷組織形成，得到愈傷花蕾，該誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述6-芐基嘌呤的濃度為5.0?mg/L，所述萘乙酸濃度為5.0?mg/L，所述蔗糖的質(zhì)量百分濃度為3.0%；

c、將上述愈傷花蕾再接種于含有6-芐基嘌呤、萘乙酸和蔗糖的分化培養(yǎng)基上，分化培養(yǎng)至不定芽形成，得到“御衣黃”組培苗，該分化培養(yǎng)基中，所述6-芐基嘌呤的濃度為1.5mg/L，所述萘乙酸濃度為0.3?mg/L，所述蔗糖的質(zhì)量百分濃度為3.0%；

d、上述步驟b的誘導(dǎo)培養(yǎng)和步驟c的分化培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度都為24～26℃，光照都為2000?Lux，每日光照時(shí)間都為16?h。

上述誘導(dǎo)培養(yǎng)基和分化培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液為MS（Murashige?and?Skoog）。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于一種大花萱草“御衣黃”花蕾的組培方法，花蕾依次通過(guò)洗潔精、75%乙醇和0.1%?HgCl₂溶液浸泡獲得無(wú)菌花蕾，滅菌效果較好，后續(xù)培養(yǎng)污染較少，而花蕾死亡率較低，再用誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)形成愈傷組織，得到愈傷花蕾；然后用分化培養(yǎng)基培養(yǎng)至不定芽形成，得到“御衣黃”組培苗；愈傷和不定芽的分級(jí)培育，不定芽增殖較快，且質(zhì)量較好，一朵大花萱草“御衣黃”花蕾一年內(nèi)可繁殖出2萬(wàn)株苗可用的生根組培苗，不定芽每1個(gè)月可增殖一次，且增殖系數(shù)始終保持在4.2～5.2之間，因此培育周期短，為實(shí)現(xiàn)大花萱草“御衣黃”大規(guī)模，高繁殖率的工廠(chǎng)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。

實(shí)施例