[發(fā)明專利]水稻抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子標(biāo)記方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110008274.1 | 申請日： | 2011-01-17 |
| 公開（公告）號： | CN102154470A | 公開（公告）日： | 2011-08-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王建飛;張紅生;鮑永美;謝留杰;張曉軍;黃驥;王州飛;吳云雨 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218 | 代理人： | 徐冬濤 |
| 地址： | 210095 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 水稻 稻瘟病 基因 pi hk1 分子 標(biāo)記 方法 | ||
1.水稻黑殼子粳抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子標(biāo)記方法，其特征在于包括如下步驟：
(1)取水稻樣品，提取水稻樣品基因組DNA；
(2)利用表1中的任意1對、2對或3對水稻黑殼子粳抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子標(biāo)記引物對所述的水稻樣品基因組DNA進行PCR擴增，PCR擴增產(chǎn)物在8％非變性聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳檢測，如果擴增出對應(yīng)大小的分子標(biāo)記片段，標(biāo)志著Pi-hk1(t)基因的存在，
表1
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水稻黑殼子粳抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子標(biāo)記方法，其特征在于所述的PCR擴增的反應(yīng)體系為：10×buffer?1.0微升，4pmol/微升的InDel或SSR引物對1微升，2.5mM?dNTPs?0.2微升，5單位/微升的Taq酶0.1微升，10納克/微升的水稻樣品基因組模板DNA?1微升，加水至10微升；反應(yīng)程序為：DNA?94℃預(yù)變性5min后；94℃變性30sec，55℃退火30sec，72℃延伸展1min，循環(huán)35次；最后72℃延伸10min。
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