[發明專利]一種疫苗免疫效果評價蛋白芯片的制備及用途

無效

• 申請號: 201110007925.5
• 申請日: 2011-01-14
• 公開（公告）號: CN102175874A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 王升啟;顏浩;陳蘇紅;劉琪琦;張敏麗;劉志紅
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/64;G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用蛋白芯片技術檢測疫苗保護性抗體的方法及其在評價疫苗接種效果中的應用，其特征在于由表面經過處理的片基、捕獲抗原及顯色試劑組成，捕獲抗原固定于片基表面，待測樣品中的保護性抗體能與特定的捕獲抗原特異性結合而錨定在芯片相應位置上，經顯色試劑顯色后通過信號掃描等分析即可判定每份樣品中是否含有各種疫苗的保護性抗體。

2.根據權力要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述捕獲抗原為多種疫苗對應病種病原體的保護性抗原也可為相應疫苗經不同處理方法處理后的抗原物質，每一種捕獲抗原對應檢測一個病種的保護性抗體，所有的捕獲抗原以矩陣形式點在表面經過處理的片基上，這樣通過一次反應就能同時檢測多種抗體。

3.根據權力要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述疫苗對應病種病原體包括麻疹病毒、風疹病毒、腮腺炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、乙型腦炎病毒、脊髓灰質炎病毒、百日咳桿菌、白喉桿菌、破傷風桿菌、結核桿菌、出血熱病毒、炭疽桿菌、鉤端螺旋體和腦膜炎奈瑟菌等，對應的疫苗包括麻疹疫苗、風疹疫苗、腮腺炎疫苗、甲肝疫苗、乙肝疫苗、乙腦疫苗、脊灰疫苗、百日咳疫苗、白喉疫苗、破傷風疫苗、卡介苗、出血熱疫苗、炭疽疫苗、鉤體疫苗和A群流腦疫苗等。

4.根據權力要求1和2所述的蛋白芯片，其特征在于，所述疫苗的不同處理方法為：將疫苗液濃縮后，用飽和碳酸鈉溶液以去除氫氧化鋁等佐劑、重鉻酸鉀與稀鹽酸混合液去除明膠等保護劑或用乙醇沉淀疫苗中的抗原物質。

5.根據權力要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述顯色試劑為已標記報告分子的能與待測抗體結合的蛋白，如二抗、Protein?A/G。

6.根據權力要求1和5所述的蛋白芯片，其特征在于，報告分子可為Cy3、Cy5、FITC、Nanogold或HRP，標記物不同擁有不同的信號檢測方法。

7.根據權力要求1和6所述的蛋白芯片，其特征在于，包括以下信號檢測方法：

(1)Cy3、Cy5或FITC標記：直接置于熒光掃描儀中顯示并分析結果；

(2)Nanogold標記：各反應區加入適量銀增強試劑顯色，避光反應數分鐘后用水終止反應，可直接用肉眼觀察結果，也可用普通掃描儀分析結果；

(3)HRP標記：各反應區加入適量納米金復合底物(Nanogold-DAB)后，再加入適量銀增強試劑顯色，避光反應數分鐘后用水終止反應，可直接用肉眼觀察結果，也可用普通掃描儀分析結果，靈敏度較現有方法提高10-100倍。

8.權力要求1和2所述的蛋白芯片可被分隔成多個反應區，最佳為2-12個，每個反應區點制有相同的捕獲抗原陣列，這樣通過一次反應就能同時檢測多份標本。