[發明專利]一種診斷馬泰勒蟲的檢測試劑盒及制備與使用方法

有效

• 申請號: 201110003531.2
• 申請日: 2011-01-06
• 公開（公告）號: CN102146445A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發明（設計）人: 劉光遠;謝俊仁;田占成
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12R1/90
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張晉

1.診斷馬泰勒蟲的檢測試劑盒，其特征在于試劑盒內至少有四條馬泰勒蟲特異性引物TeF3、TeB3、TeFIP和TeBIP，具體序列如下：

TeF3：5’-TTAGACCTAAAACCTCCCCG-3’；

TeB3：5’-TTCCTTAGATGTGGTAGCCG-3’；

TeFIP：5’-CATCGCCAGCAAAGCCATGCGAATTCTTTTGCGGTGTTTCGGTG-3’；

TeBIP：5’-TGACCTATCAGCTTTGGACGGTGAATTCTCTCCGGAATCGAACCCT-3’。

2.根據權利要求1所述的鑒別診斷馬泰勒蟲的LAMP試劑盒，其特征是試劑盒內有：

a)標準馬泰勒蟲基因組DNA；

b)標準駑巴貝斯蟲基因組DNA；

c)標準馬梨形蟲陰性(即，馬泰勒蟲和駑巴貝斯蟲檢測呈雙陰性)的馬基因組DNA；

d)標準馬梨形蟲陰性的驢基因組DNA；

e)標準馬梨形蟲陰性的騾基因組DNA；

f)滅菌超純水；

g)LAMP反應緩沖液；

h)DNA聚合酶；

i)由40pmol的TeFIP和TeBIP，5pmol的TeF3和TeB3組成的馬泰勒蟲特異引物混合物。

3.權利要求1至2所述的試劑盒的使用方法，其特征是提取待測馬屬動物的血液的基因組DNA，將此基因組DNA與DNA聚合酶、緩沖液、滅菌超純水以及試劑盒中的馬泰勒蟲特異引物混合物按比例混合均勻后進行環介導的恒溫擴增，擴增后立刻滅活DNA聚合酶，取擴增產物以TAE為緩沖液，再置于含溴化乙錠的瓊脂糖凝膠中，進行電泳，在紫外燈下觀察，根據特定泳道是否出現特異性電泳帶型確定被檢動物是否患有馬泰勒蟲病。